当前位置:上海抚生实业有限公司>>ELISA试剂盒实验原理>>小鼠ELISA试剂盒实验原理>> 48T/96TPL-A2小鼠磷脂酶A2ELISA试剂盒实验原理
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | PL-A2小鼠磷脂酶A2ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Mouse Phospholipidase A2, PL-A2 Elisa Kit |
货号 | FS-M64359 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5公司产品仅用于科研可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
动力蛋白激活蛋白6抗体Prionitin别名: 分子式: C21H26O2性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库
脱酶2抗体Dayecrystal A别名: 分子式: C20H32O3性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库
磷化DNA依赖性蛋白激酶抗体6α,16,18-Trihydroxycleroda-3,13-dien-15,16-olide别名: 分子式: C20H30O5性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库
防御素α4抗体Trichokaurin别名: Enmenin分子式: C24H34O7性状: Powder纯度: 97.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 贝壳杉烷;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库
DNA损伤结合蛋白1抗体Sugiol别名: 分子式: C20H28O2性状: Powder纯度: 98.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 抗炎;抗氧化;丹参;柳杉;松香烷;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库
DNA损伤结合蛋白2抗体16-Hydroxy-2-oxocleroda-3,13-dien-15,16-olide别名: 分子式: C20H28O4性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 克罗烷型;植物提取物;天然产物;天然产物库
CD299抗体Wedelobatin B别名: 分子式: C30H44O3性状: Oil纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 贝壳杉烷;植物提取物;天然产物;天然产物库
C型凝集素结构域家族4成员A抗体Acetylsvennic acid别名: 分子式: C22H32O4性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 贝壳杉烷;植物提取物;天然产物;天然产物库
PL-A2小鼠磷脂酶A2ELISA试剂盒实验原理葡萄糖合成酶1抗体Monkey MMRN1 (Multimerin 1) ELISA Kit
G蛋白修补结构域蛋白8抗体Monkey CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit
甘油激酶3抗体Monkey IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit
高尔基体磷蛋白3样蛋白抗体Monkey 12-HETE (12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit
磷化谷氨受体1抗体Monkey MT3 (Metallothionein 3) ELISA Kit
G蛋白修补结构域蛋白1抗体Monkey GH2 (Growth Hormone 2) ELISA Kit
磷化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体Monkey BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) ELISA Kit
磷化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1Monkey TP5 (Thymopentin) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
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