当前位置:上海抚生实业有限公司>>ELISA试剂盒实验原理>>人ELISA试剂盒实验原理>> 48T/96TIDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA试剂盒实验原理
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
产品名称 | IDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human α-L-iduronidase, IDUA Elisa Kit |
货号 | FS-H63889 |
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
二氨荃庚二别名: 2,6-二氨基庚二英文名称: 2,6-Diaminopimelic acid: 583-93-7分子式: C7H14N2O4
原卟啉化钴英文名称: Co(III) Protoporphyrin IX chloride: 102601-60-5单位: 瓶货期: 2-3天
二十烷别名: 二十烷;正二十烷英文名称: Eicosane: 112-95-8分子式: C20H42
5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯别名: 5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯英文名称: 5(6)-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide esr: 117548-22-8分子式: C25H15NO9
蜂蜡别名: 蜜蜡;中国蜡;虫蜡;川蜡;黄蜡英文名称: Bees wax,whi: 8012-89-3储存条件: RT
化钙溶液(1mol/L)储存条件: RT,有效期6个月柠檬钙四水物别名: 枸橼钙;2-羟基-1,2,3-丙三羧钙盐英文名称: CalClum Cltra trahydra: 5785-44-4分子式: C12H10Ca3O14·4H2O
苄基三基化磷(BPP)有效期: 2年别名: 三基苄基化膦;磷盐“P”英文名称: Benzyltriphenylphosphonium chloride: 1100-88-5
IDUA人αL艾杜糖苷酸酶ELISA试剂盒实验原理AE3/FITC 荧光素标记阴离子交换蛋白3抗体IgG锚蛋白重复结构域蛋白40抗体3,5-双(基)苯甲Mouse K2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit
AEV/FITC 荧光素标记禽脑脊髓炎病抗体IgG凋亡抑制因子5抗体[双(三乙酰氧基)]苯Mouse K3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit
AEBP1/FITC 荧光素标记脂肪增强结合蛋白1抗体IgG水通道蛋白-3抗体[双(三乙酰氧基)]苯Mouse NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit
AF6/Afadin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、鼠丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG载脂蛋白D抗体3,5-二溴Mouse NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit
phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、鼠磷化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG丁酰基辅酶A合成酶3抗体3,5-二Mouse NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2) ELISA Kit
AGER/RAGE /FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgG脂肪源性亮氨氨基肽酶抗体(血管内皮生长因子诱导蛋白)2,5-二苯酚Mouse NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit
AGEs/FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物抗体IgG线粒体凋亡诱导因子2抗体2,5-二苯酚Mouse NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit
AGER/RAGE/Cy3 荧光素Cy3标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgGABL2蛋白抗体3,4-二苯酚Mouse NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
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