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货号 | FS-X10595 |
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中文名称:RARα激动剂(AM580)
英文名称:AM580
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
货号:FS-X10595
产品介绍:
AM580是一种稳定的retinobenzoic衍生物,是RARα的激动剂。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! 号:102121-60-8 别名:CD336;NSC608001;Ro 40-6055 纯度:99.41% 分子量:351.44 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
大肠杆菌突触结合蛋白12抗体Anti-PRLR Antibody角蛋白14(KRT14)
蕈青霉大肠杆菌志贺样Ⅱ型突变体(O139菌型)抗体Anti-PRLR Antibody角蛋白13(KRT13)
高温紫链霉菌泛连接Siah1抗体Anti-PRMT1 Antibody角蛋白12(KRT12)
褐球固氮菌磷化信号转导分子Smad-1抗体Anti-PRMT5 Antibody角蛋白10(KRT10)
镰刀菌属磷化5-脂氧合抗体Anti-PRMT1 Antibody角蛋白1(KRT1)
高加索奶乳杆菌磷化5-脂氧合抗体Anti-PRND Antibody焦磷2(PPA2)
柱黄曲霉应激诱导分泌蛋白1抗体Anti-PRMT8 Antibody焦磷1(PPA1)
松口蘑抗肿瘤蛋白ANUP抗体Anti-PRNP Antibody胶质系来源神经营养因子受体α1(GFRα1)
赖芽胞杆菌属小谷酰三角四肽重复区蛋白α抗体Anti-PRNP Antibody胶质成熟因子γ(MPFγ)
巨大芽孢杆菌SUGT1蛋白抗体Anti-PRNP Antibody胶乳(LXN)
粪肠球菌纺锤体和着丝粒相关蛋白3抗体Anti-PRNP Antibody(PB0833)降钙受体(CTR)
金灰青霉纺锤体和着丝粒相关蛋白2抗体Anti-PROC Antibody腱调蛋白(TNMD)
鸡伤门氏菌转录因子蛋白SIM1抗体Anti-PROC Antibody腱蛋白样蛋白1(CHRDL1)
球孢白僵菌核转录因子SOX14抗体Anti-PROCR Antibody腱蛋白(CHRD)
酿酒酵母信号转导与转录激活因子1抗体Anti-PROM1 Antibody碱性唾液脯丰富蛋白2(PRB2)
巨大芽孢杆菌 A核转录因子SOX6抗体Anti-PROK1 Antibody碱性唾液脯丰富蛋白1(PRB1)
胚胎神经细胞NNAT抗体痰塔特姆氏菌小鼠大隐静脉内皮细胞提取物
神经肽Y受体5抗体科氏葡萄球菌科氏亚种小鼠主动脉平滑肌细胞提取物
神经肽Y受体4抗体单形拟杆菌小鼠肠微血管细胞提取物
螺旋环螺旋蛋白1+2抗体假结合棒杆菌小鼠血管内皮细胞提取物
RARα激动剂(AM580)细交链孢 硝镁,六水单氧化
异常毕赤酵母 三氧化二钛丝蛋白抑制剂
枯草芽孢杆 2-氨基-2'-氟-2'-脱氧腺MAP激相互作用的丝;苏激
皮诺卡氏 一氧化锰磷化MAP激相互作用丝,苏激
桃色枝顶孢 硅几丁质
新月弯孢 2,3-二氟苯甲尿核辅
长孢链霉 (1S)-(-)-樟脑烷尿核辅
黄絮鳞鹅膏 甲钴甘氨酰脯二肽氨基肽
运动替斯崔纳 4--2-胆固
水栖黄杆 11-叠氮-3,6,9-三氧杂十一烷-1-胰岛样生长因子1
柠檬色短小杆 6,7-二氢-4-苯并[b]噻吩酮总蛋白
葡萄座腔 三(4-三氟甲苯基)膦1磷鞘氨
近缘弯孢 5'-O-[(二异基氨基)-(2-基乙氧基)氧磷基]-3'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)胸异柠檬脱氢
木糖氧化无色杆 Fmoc-(2-苄氧基羰基)赖磷
牛病性腹泻病 2-亚氨基生物琥珀脱氢
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