人骨肉瘤细胞带荧光素酶； 143B/LUC (STR) 返回列表页

一、概念不同

1、细胞株：细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。

2、细胞系：细胞系（cell line）指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。

二、形成方法不同

1、细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物成为细胞株。

2、细胞系：经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机，原代培养物经传代成功成为细胞系。

三、细胞的延续性不同

1、细胞株：原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机"而继续传下去，这些存活的细胞一般能够传到40--50代，这种传代细胞叫做细胞株。

2、细胞系：细胞株的遗传物质没有发生改变。当细胞传至50代以后又会出现“危机"，不能再传下去。但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，并且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称为细胞系。

人骨肉瘤细胞带荧光素酶； 143B/LUC (STR)

细胞培养的步骤：

细胞培养前的准备

细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。

这些变质征象可能为多种原因所致，例如：培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质，或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。

变质严重时将会成为不可逆的变化。

细胞培养通风橱的消毒及布局

保持细胞培养通风橱内的整洁有序，将所有物品置于直视范围内。

向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇，擦拭清洁进行消毒。

在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器；移液器置于右前方易于取用；试剂和培养基置于右后方便于吸取；试管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放废液。

培养瓶/皿等物品的无菌操作

细胞培养污染物主要分为两类：

化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。

生物污染物，如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。

可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度。

交叉污染的确认

为细胞换液时，要沿着培养瓶的一侧轻轻地加入，而不是直接加到细胞中，以免损伤细胞，当培养的细胞株较为脆弱时尤其需要注意。

使用无菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液体时，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。

细胞传代的时间把握

当细胞呈指数增殖，贴壁培养的细胞已占据所有可用基质、没有扩增空间，或悬浮培养的细胞已超过培养基质所支撑的能力，无法进一步生长时，细胞增殖速度将大大降低甚至停止。为了将细胞密度维持在最佳水平，以便细胞继续生长，并且刺激进一步增殖，必须对细胞进行传代。

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