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细胞周期检测试剂盒

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更新时间:2022-05-11 14:03:20浏览次数:180次

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货号 FS-X9724
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细胞周期检测试剂盒


20T|50T|100T

FS-X9724

产品介绍:

细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期组成。G1 期:细胞开始RNA和蛋白质的合成,但DNA含量仍保持二倍体。S 期:DNA 开始合成,这时细胞核内DNA的含量介于G1 期和G2 期之间。当DNA 复制结束成为4倍体时,细胞进入G2 期。G2 期的细胞继续合成RNA及蛋白质,直到进入M 期。因此,单纯从DNA含量无法区分G2 期和M 期。一旦有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,这两个细胞或者进入下一个细胞周期,或者进入静止期(G0期),而G0 期从DNA含量上同样无法与G1 期区分。因此,整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M 期。通过核酸染料PI标记DNA,并由流式细胞仪进行分析,可以得到细胞各个时期的分布状态,计算出G0/G1%、S%、G2/M%,了解增殖能力,在肿瘤病理学研究中,通常以S 期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。

PI 为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA 双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。PI染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA 复制的S 期细胞的荧光强度为1-2 之间。

细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA 能够和荧光染料结合的特性,细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。

储存条件:-20℃避光保存。

有效期:一年。

注意事项:

1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

胞内离子通道蛋白1(CLIC1)英文名:CLIC1 粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体包装500g

胞浆型磷脂A2(cPLA2)英文名:cPLA2 卡尔曼综合症基因1抗体包装100mg

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白三烯B4(LTB4)英文名:LTB4 腺苷琥珀裂解抗体包装100g

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血管紧张原抗体骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一种ATP-竞争性的 Aurora kinase 抑制剂,作用于 Aurora A,Aurora B 和 Aurora C,IC50 分别
细胞周期检测试剂盒土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯结合珠蛋白

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根霉属的 4-异喹啉解脲脲原体抗体

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色褐链霉 盐酸去甲林解整合样金属蛋白33

*美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合样金属蛋白9

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鲁氏毛霉 1-甲巯基环基乙酸甲酯金黄色葡萄球肠A

纠缠青霉 1-羟甲基环基乙金黄色葡萄球蛋白A

腐皮镰孢 四氟酸亚铁(II)金葡肠

阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金属硫蛋白

淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金属肽含血小板反应蛋白1

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乳酒假丝酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯紧密连接蛋白

操作步骤:

1、贴壁细胞的消化

①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变

化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的*细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


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