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| 货号 | FS-X10489 |
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中文名称：Syk抑制剂(GS-9973)
英文名称：GS-9973
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
货号：FS-X10489
产品介绍:
英文名称：GS-9973 产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg GS-9973是一种选择性的Syk抑制剂，IC50值为7.7nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ 号：1229208-44-9 别名：Entospletinib 纯度：99.23% 分子量：411.46 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
葡萄座腔菌磷化Src原癌基因抗体Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody雄烯(ADT)
酿酒酵母SH2结构含磷肌SHIP1抗体Anti-FLT1 Antibody雄烯二(AED)
Sphingomonas desiccabilisC-SKI抗体Anti-FLT3 Antibody雄激诱导蛋白1(AIG1)
粘着剑菌磷化糖皮质激调节激1抗体Anti-FLT3 Antibody胸腺因子(TF)
枯草芽胞杆菌磷化核基质结合区结合蛋白1抗体Anti-FLT3LG Antibody胸腺β4(Tβ4)
谢瓦散囊菌磷化糖皮质激调节激1抗体Anti-FLT3LG Antibody胸腺β10(TMSβ10)
藤仓赤霉磷化糖皮质激调节激1抗体Anti-FLT3LG Antibody胸腺生成(TMPO)
薄层杆菌分泌型卷曲相关蛋白1抗体Anti-FLT4 Antibody胸腺旁腺(PTMS)
枯草芽孢杆菌精结合蛋白2抗体Anti-FLT4 Antibody胸腺激活调节趋化因子(TARC)
*灰葡萄孢溶质载体锌转运3抗体Anti-FMN1 Antibody胸腺表达趋化因子(TECK)
假诺卡氏菌丝蛋白抑制剂13抗体Anti-FMO1 Antibody胸肾表达趋化因子(BRAK)
加纳链霉菌丝/苏激25抗体Anti-FMO4 Antibody胸合成(TYMS)
尖孢镰刀菌染色体特异性转录延伸因子抗体Anti-FMO2 Antibody胸嘧啶DNA糖基化(TDG)
新城疫病阅读障碍相关蛋白Shootin抗体Anti-FMO3 Antibody性别决定区Y框蛋白9(SOX9)
壳蕉孢菌外纺锤体样蛋白1抗体Anti-FMO5 Antibody性别决定区Y框蛋白3(SOX3)
烟色链霉菌溶质转运蛋白家族44成员1抗体Anti-FMR1 Antibody性别决定区Y框蛋白2(SOX2)
硫酯2蛋白抗体燕麦状曲霉ST猪睾丸细胞
超氧化物歧化3抗体解脂耶氏酵母YAC-1小鼠淋巴瘤细胞
可溶性载质转运蛋白2B1抗体白曲霉HELF 人胚肺成纤维细胞
长链脂肪连接抗体红曲红曲菌MKN-28人胃癌高转移细胞
Syk抑制剂(GS-9973)新疆糖丝 喹唑啉EB病抗体
海绵假单胞 十一烷基-β-D-麦芽糖NADH脱氢
鞘氨属 羰酰二氢三(三苯基膦)钌(II)载脂蛋白C1
乔治亚青霉 蔗糖十二烷酯大鼠T表面糖蛋白CD1a
强雄腐霉 6-(1H-吡唑-1-基)烟整合α5
大弯杆 四丁3-羟基犬尿
粉红聚端孢 3-乙酰-2,5-二甲基噻吩顺乌头
大肠埃希氏(大肠杆) 三氟磺镱水合物因子信号转导抑制因子3
产黄青霉 庚酰组蛋白脱乙酰基6
Erythrobacter pelagi 2,5-二甲氧基溴苯过氧化4
季也蒙假丝酵母 羟基乙叉二膦 一水合物 （HEDP）可溶性血管内皮蛋白C受体
橄榄色青霉 2.6-二-4-硝基吡啶分泌型磷脂A2
南方树舌 聚四酰基氧化
酿酒酵母 聚四抗人沙门氏杆抗体
红淡紫灰链霉 聚（甲基乙烯基共聚马来）17-β-羟基类固脱氢3
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