SW1116人结肠腺癌细胞 返回列表页

商品介绍：

细胞冻存注意事项：
(1)  细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2)  保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3)  细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4)  储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

公司正在出售的产品：

环指蛋白41抗体　英文名；RNF4119号染色体开放阅读框67抗体　英文名；C19orf67

环指蛋白43抗体　英文名；RNF4319号染色体开放阅读框70抗体　英文名；QIL1/C19orf70

环指蛋白44抗体　英文名；RNF4419号染色体开放阅读框71抗体　英文名；C19orf71

环指蛋白45/自分泌运动因子受体抗体　英文名；RNF4519号染色体开放阅读框73抗体　英文名；C19orf73

环指蛋白47抗体　英文名；RNF4719号染色体开放阅读框75抗体　英文名；C19orf75

环指蛋白56抗体　英文名；RNF5619号染色体开放阅读框77抗体　英文名；C19orf77

环指蛋白59抗体　英文名；RNF59/MID119号染色体开放阅读框7抗体　英文名；ZC3H4/C19orf7

环指蛋白5抗体　英文名；RING519号染色体开放阅读框80单克隆抗体　英文名；ANGPTL8

环指蛋白60抗体　英文名；MID219号染色体开放阅读框80抗体　英文名；ANGPTL8

环指蛋白61抗体　英文名；RNF61/MKRN11号染色体开放阅读框100抗体　英文名；C1orf100

环指蛋白62抗体　英文名；RNF62/MKRN21号染色体开放阅读框103抗体　英文名；C1orf103

SW1116人结肠腺癌细胞环指蛋白67抗体　英文名；NEURL1号染色体开放阅读框104抗体　英文名；C1orf104

环指蛋白6抗体　英文名；RNF61号染色体开放阅读框105抗体　英文名；C1orf105

环指蛋白70抗体　英文名；RNF701号染色体开放阅读框106抗体　英文名；C1orf106

环指蛋白74抗体　英文名；RNF741号染色体开放阅读框109抗体　英文名；C1orf109

环指蛋白75单克隆抗体　英文名；RBX11号染色体开放阅读框110抗体　英文名；C1orf110

环指蛋白75抗体　英文名；RBX11号染色体开放阅读框111抗体　英文名；C1ORF111

操作步骤:

(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。