HT-29 (HT29)人结肠癌细胞 返回列表页

公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。

商品介绍：

细胞冻存注意事项：
(1)  细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2)  保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3)  细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4)  储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

操作步骤:

(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

HT-29 (HT29)人结肠癌细胞(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。

公司正在出售的产品：

APC标记人CD123单克隆抗体　英文名；human CD123/APC  丝聚蛋白/中间丝相关蛋白抗体　英文名；Filaggrin

APC标记人CD38单克隆抗体　英文名；human CD38/APC  丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体　英文名；MAPKAP Kinase 2

APC标记人TNF-α单克隆抗体　英文名；human TNF-α/APC  死亡相关蛋白1抗体　英文名；DAP1

APC标记小鼠CD86单克隆抗体　英文名；mouse CD86/APC  四磷酸鸟苷水解酶抗体　英文名；HDDC3

ATPIF1蛋白抗体　英文名；ATPIF1  髓鞘缺陷相关蛋白抗体　英文名；FAM126A

ATP依赖RNA解旋酶DDX54抗体　英文名；DDX54  羧肽酶X(M14家族2)抗体　英文名；CPXM2

ATP依赖解旋酶SMARCA2抗体　英文名；SMARCA2  碳水化合物磺基转移酶10抗体　英文名；CHST10

B7H6蛋白抗体　英文名；B7-H6  唐氏综合征临界区域蛋白4抗体　英文名；DSCR4

磷酸化沉默调节蛋白1抗体  CD34重组兔单抗

磷酸化蛋白激酶C α/β2抗体  CD4单克隆抗体

磷酸化动力相关蛋白1抗体  CD81抗体

磷酸化干扰素调节因子7抗体  CENTA2蛋白抗体

磷酸化红细胞膜条带4.1蛋白抗体  COL10A1重组兔单克隆抗体

磷酸化甲状腺受体相关蛋白220抗体  CRX抗体

磷酸化淋巴增强因子-1抗体  Cy3标记的血管内皮细胞生长因子受体3抗体