HEP G2/2.2.1人肝癌细胞 返回列表页

商品介绍：

细胞冻存注意事项：
(1)  细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2)  保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3)  细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4)  储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

公司正在出售的产品：

磷酸化µ-型阿片受体抗体Bax抗体

磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗体Bax相互作用因子1抗体

磷酸化14-3-3 β/ζ抗体Bax重组兔单克隆抗体

磷酸化14-3-3 τ抗体BCL10单克隆抗体

磷酸化14-3-3E蛋白抗体BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体

磷酸化17β羟基类固醇脱氢酶13抗体BCL10抗体

磷酸化1型神经纤维瘤抗体Bcl-10重组兔单克隆抗体

磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体Bcl2 alpha蛋白抗体

HEP G2/2.2.1人肝癌细胞磷酸化2型神经纤维瘤抗体Bcl2 beta蛋白抗体

卷曲螺旋结构域蛋白51抗体　英文名；CCDC51AKT1S1单克隆抗体　英文名；AKT1S1

卷曲螺旋结构域蛋白52抗体　英文名；CCDC52AKT相互作用蛋白蛋白抗体　英文名；FTS

卷曲螺旋结构域蛋白54抗体　英文名；CCDC54AKT相互作用蛋白抗体　英文名；FTS/AKTIP

卷曲螺旋结构域蛋白56抗体　英文名；CCDC56ALDH3A2单克隆抗体　英文名；ALDH3A2

操作步骤:

(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。