CUT-Tag技术服务-研究DNA与蛋白互作 返回列表页

CUT-Tag互作技术服务-研究DNA与蛋白互作（Cleavage Under Targets and Tagmentation）是研究DNA与蛋白互作的新技术。与ChIP-Seq相比，CUT&Tag不需要甲醛交联和免疫共沉淀的过程，而是通过靶蛋白的抗体和Protein A的介导，使Protein A融合的Tn5转座酶靶向并切割DNA，同时在序列两端加上测序接头，经PCR扩增后形成高通量测序文库。

（CUT-Tag互作技术服务-研究DNA与蛋白互作）实验流程图

细胞与ConA beads结合——细胞渗透性处理——一抗与目的蛋白特异性结合——二抗结合一抗放大信号——加入pA-Tn5与抗体结合——通过Mg2+激活转座体，片段化目的蛋白结合的DNA，并加上接头序列——DNA提取与扩增-高通量测序

使用CUT&Tag，鉴定H3K27me3在染色质水平上的peaks。与ChIP-seq相比，在相同Reads条件下，两者的Peaks一致，并且CUT&Tag的信噪比更高、背景更低。

参考文献：

Kaya-Okur HS, Wu SJ, Codomo CA, Pledger ES, Bryson TD, Henikoff JG, Ahmad K, Henikoff S. CUT&Tag for efficient epigenomic profiling of small samples and single cells. Nat Commun. 2019 Apr 29;10(1):1930. doi: 10.1038/s41467-019-09982-5.