在免疫荧光（Immunofluorescence，IF）实验中，通常会在同一组织细胞标本上同时检测两种抗原，因而进行双重荧光染色（直接法和间接法）。一般来说，直接法简便可靠，但灵敏度较低，而且抗体来源较少；因此，大部分人会选择间接免疫荧光法：先用两种不同种属来源的特异性一抗孵育，再用对应的不同荧光素标记的二抗孵育，从而在荧光显微镜下观测。
在免疫荧光实验中，有时候也需要同时对两个或多个目标蛋白进行共定位。此时，可以选择两个带有不同荧光颜色标记的一抗；然而，在更多的情况下，需要通过两到三种不同种属来源的未标记一抗，再配合两到三种带不同荧光标记的二抗以实现IF 双标或三标。那么该如何选择合适的免疫双标/多标实验的二抗？
首先需要考虑荧光颜色的选择
红色和绿色是常见的两种荧光选择，绿色如FITC、Cy2或新一代Dylight 488等荧光染料；橙色如TRITC、Cy3 等荧光染料，而Texas Red则显示红色，Cy5、Cy7、APC或新一代荧光染料Dylight 649等则提供了深红色显示方案。目前IF双标一般优先选择红色和绿色；如果是三标，则第三种颜色选择蓝色，如AMCA 或者新一代Dylight 350、Dylight 405等。IFkine®系列荧光二抗来自于一代的荧光标记基团，在荧光强度、信噪比以及荧光的耐淬灭性上远远由于通用的FITC、TRITC、罗丹明等常规荧光基团的优势，同时具有接近或优于第二代荧光染料Alexa Flour和Dylight的荧光表现。其IFkine® Green提供绿色标记方案，IFkine® Green则是Cy3和罗丹明的替代物，IFkine® Red则为Texas Red提供更*的红色荧光方案。该系列荧光团具有更高的荧光强度、更低的背景、更佳的抗淬灭性以及优异的性价比。
另外二抗的类型对IF双标/多标也有莫大的影响
在免疫荧光双标或多标时，首先样本本身的复杂条件可能会产生与二抗的非特异性杂交；另外，由于同时有两个一抗分子，因此一抗与二抗之间也有一定的非特异性结合。IFkine®系列荧光二抗经过特别优化，其针对目的种属的特异性非常高，同时针对其他非目的种属的抗体分子的非特异性结合降到低，同时避免了二抗与样本以及其它一抗的非特异性杂交。
在二抗的种属来源角度，因为需要考虑一抗的不同种属来源，以及免疫荧光封闭血清的选择。二抗的种属与一抗的种属有所区别，同时考虑到血清的种属来源要与二抗*，所以优的情况是，IF多标实验中二抗的种属来源于非小鼠、非兔、非山羊，而是选择驴、马、鸡等种属来源，并且二抗采用一样的种属来源，这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。IFkine®系列荧光二抗均来源于驴，可以配合驴血清进行封闭，效果非常好，在免疫荧光双标以及多标实验中有更出众的表现。IFKine®系列荧光（IFKine Green、IFKine Orange和IFKine Red）的激发光谱：
| IFKine®荧光团 | 激发光 | 发射光 | 发射颜色 | 替代基团 |
| IFKine Green | 493nm | 518nm | 绿色 | FITC/Cy2/Alexa 488/Dylight 488 |
| IFKine Orange | 555nm | 570nm | 橙色 | Cy3/Rhodamin/Alexa 555/Dylight 549 |
| IFKine Red | 591nm | 615nm | 红色 | Texas Red/Alexa 594/Dylight 594 |
作为*的系列新型荧光抗体产品，IFKine®具有市场上高的荧光染色亮度和耐光性，并兼具较少的非特异性杂交和背景，非常适合作为免疫荧光和流式细胞术实验。驴来源二抗以确保在多标使用中的通用型，并且经过特殊处理，其与其它种属来源的蛋白样本或抗体几乎没有交叉反应，因此其在免疫荧光分析的双标以及多标实验中有更出众的表现。我们向您*美国Abbkine*的液体形式的小包装IFKine®系列荧光二抗产品，目前推出的产品主要是：
| 产品名称 | 品牌 | 货号 | 产品说明 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24211 | 详情 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L) | Abbkine | A24221 | 详情 |
| IFKine Green AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG(H+L) | Abbkine | A24231 | 详情 |
| IKine Orange AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24311 | 详情 |
| IFKine Red AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG(H+L) | Abbkine | A24411 | 详情 |
| IFKine Red AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG(H+L) | Abbkine | A24421 | 详情 |
上述产品，Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场，提供化的产品质量追踪和售后服务以及保障，如果您在使用过程中有任何问题，请直接与其当地代理商艾美捷科技有限公司。
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区域代理，将为客户提供的常规免疫学试剂，如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗，抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家品牌的的中国代理或区域代理，艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣，请致电免费客户专线到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
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