上海沪鼎讲解ELISA实验洗涤重要性

ELISA试剂盒实验步骤包括加样、洗涤、温育、比色等！每个步骤在过程中都起到举足轻重的作用，洗涤在实验过程中有什么样的重要性呢？上海沪鼎为您讲解ELISA实验洗涤的重要性！

    洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来 达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或 抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑 料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可 以说在 ELISA 操作中，洗涤是zui主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格 按要求洗涤，不得马虎。

    洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的， 非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结 合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质 回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温 20，其浓 度可在 0.05%-0.2%之间，高于 0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验 的灵敏度。

    洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释，应按要求稀释，所用的水电 导率在 1.5us/cm 之下，洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为 40 秒左 右，孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好，手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。