UMNSAH/DF-1鸡胚胎成纤维细胞-上海抚生实业有限公司

货号	A01X1173	规格	1×106
英文名称	UMNSAH/DF-1细胞	产品分类	其它细胞系
实验类型	DMEM(含NAHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 39℃培养	报告	（非人源非鼠源种属鉴定）

细胞转染：

1. UMNSAH/DF-1鸡胚胎成纤维细胞转染试剂的准备

① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

名称	UMNSAH/DF-1 (鸡胚成纤维细胞)
别称	UMNSAH-DF-1; UMNSAH-DF 1; UMNSAH-DF1; UMNSAH/DF#1; DF-1; DF1; Douglas Foster-1
种属	鸡
生长特性	贴壁细胞
细胞形态	成纤维细胞样
生长培养基	DMEM＋10% FBS＋1% P/S
冻存条件	冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%温度：39℃（Max.40℃，Min.38℃）
推荐传代比例	1:3-1:4
推荐换液频率	2~3次/周
注意事项	1、该细胞培养难度较高，温度波动会导致细胞空泡增多； 2、该细胞为38℃~40℃培养，最佳培养温度为39℃，37℃培养会影响细胞状态，建议提前准备专用培养箱； 3、受温度波动影响，收货常见细胞空泡较多，稳定培养后可恢复。
背景描述	UMNSAH/DF-1细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养，传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明UMNSAH/DF-1细胞是永生化而没有转化。UMNSAH/DF-1细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。
年龄（性别）	10日龄
组织来源	胚胎，自发永生化
细胞类型	自发永生化细胞
生物安全等级	1
倍增时间	~22-36 hours
致瘤性	No, in immunosuppressed mice.No, in semisolid medium.
保藏机构	ATCC; CRL-12203

细胞传代：

1. 试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。

3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。

4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。

5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。

6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。

7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。

8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。
细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。

着丝粒蛋白H封闭多肽	猫支原体PCR检测试剂盒
猪流感病毒（H1型）PCR试剂盒	睾丸受体4ELISA试剂盒
人低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)ELISA检测试剂盒	肝配蛋白B1ELISA试剂盒
人神经保护因子(CVNPF) ELISA检测试剂盒	IgA-Fc断片受体ELISA试剂盒
小鼠白介su11(IL-11)试剂盒ELISA	甘油激meiELISA试剂盒
人8异前列腺suF2α(8-iso-PGF2a)检测试剂盒elisa	真核翻译起始因子4A2ELISA试剂盒
分泌型卷曲相关蛋白1封闭多肽	肠球菌通用PCR试剂盒
血管内皮生长因子A封闭多肽	马媾疫锥虫PCR试剂盒
EGFR扩增和过度表达蛋白封闭多肽	鸭瘟病毒PCR试剂盒
载脂蛋白L4封闭多肽	中华鳖虹彩病毒（STIV）核suan检测试剂盒
eIF4ENIF1蛋白封闭多肽	/新城疫病毒(AIV/NDV)核suan检测试剂盒
细胞粘附分子1封闭多肽	UMNSAH/DF-1鸡胚胎成纤维细胞马流感病毒亚型PCR检测试剂盒
WDFY3蛋白封闭多肽	马克洛菌PCR试剂盒
大脑富含鸟苷suan激mei相关蛋白封闭多肽	禽传染性支气管炎病毒Conn型RT-PCR试剂盒
细胞质膜微囊蛋白-3封闭多肽	禽传染性支气管炎病毒型PCR检测试剂盒