SW48人结肠腺癌细胞-上海抚生实业有限公司

货号	A01X980	规格	1×106
英文名称	SW48细胞	产品分类	人细胞系
实验类型	DMEM+10%FBS+1%P/S	报告	提供STR鉴定报告

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

名称	SW480 [SW-480] (人结肠癌细胞) (STR鉴定正确)
别称	SW-480; SW 480; SW480E
种属	人类
年龄（性别）	男性，50岁
组织来源	直肠；结直肠腺癌
生长特性	贴壁细胞
细胞形态	上皮细胞样
背景描述	SW480 [SW-480]细胞源自原位直肠腺癌，和SW620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。CSAp和直肠抗体3阴性；角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测。SW480 [SW-480]细胞不表达细胞溶解酶，一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称，SW480 [SW-480]细胞表达GM-CSF。SW480 [SW-480]细胞ras原癌基因的12位密码子有一个突变，可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。1978年11月，A·Leibovitz将其提交给ATCC时已传代至第91代。
生物安全等级	1
生长培养基	Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例	1:2-1:4
推荐换液频率	2~3次/周
倍增时间	~30-50小时
冻存条件	冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮
培养条件	气相：空气，100% 温度：37℃
致瘤性	Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
受体表达情况	epidermal growth factor (EGF)
基因表达情况	carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes.
保藏机构	ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313 ECACC; 87092801

细胞传代：

1. 试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。

3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。

4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。

5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。

6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。

7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。

8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。

细胞转染：

1. SW48人结肠腺癌细胞转染试剂的准备

① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。

细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。

血蓝蛋白偶联物	肾综合症出血热病毒PCR检测试剂盒
甲型流感（）病毒H9亚型RT-PCR试剂盒	粪卟啉原氧化meiELISA试剂盒
人补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)试剂盒ELISA	防御suβ125ELISA试剂盒
人Ephrin-B2(EFNB2)检测试剂盒elisa	角化不良蛋白ELISA试剂盒
人血管性血友病因子/瑞斯托霉su辅因子(VWF)ELISA试剂盒	芳乙酰胺去乙酰化meiELISA试剂盒
人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗体试剂盒ELISA	alpha-1能受体ELISA试剂盒
脑表达X连锁蛋白4封闭多肽	弯曲杆菌PCR试剂盒
p21活化蛋白激meiARHG7封闭多肽	脑胞内原虫属通用·PCR检测试剂盒
DNA甲基转移mei1封闭多肽	奋森疏螺旋体PCR试剂盒
整合suαX封闭多肽	乙型肝炎病毒PCR检测试剂盒
DNA结合抑制因子1封闭多肽	牛肺线虫PCR试剂盒
锌指蛋白186封闭多肽	SW48人结肠腺癌细胞脑膜炎奈瑟菌通用型PCR检测试剂盒
6号染色体开放阅读框72封闭多肽	耐青霉su肺炎链球菌PCR试剂盒
钙/钙调蛋白依赖性蛋白激mei4封闭多肽	牛赤羽病毒RT-PCR试剂盒
泌乳升高蛋白1封闭多肽	牛附红细胞体（牛嗜血支原体）PCR试剂盒