T4 多聚核苷酸激酶（3'磷酸酶活性缺失） 返回列表页

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产品介绍：

T4 多聚核苷酸激酶（3'磷酸酶活性缺失）

描述：T4 多聚核苷酸激酶(T4 PNK)能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5’-羟基末端以及 3’-单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶还具有3’磷酸酶活性，将3’磷酸基团从寡核苷酸的 3’磷酸末端、脱氧 3’-单磷酸核苷和脱氧 3’-二磷酸核苷上水解掉。该酶经后，其 3’磷酸酶活性缺失，但仍保留了所有激酶的活性。

储存：-20℃ 可保存 2 年。
活性定义：
1Unit 指 37℃条件下，30 分钟内催化 1nmol 酸不溶性[32P] 掺入所需要的酶量。
注意：
（1）1×T4 PNK Buffer：70 mM Tris-HCl pH 7.6，10 mMMgCl2，5 mM DTT。
（2）热失活：65°C 加热 20 分钟。
（3）一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37°C温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。

\注意：1 pmol 的 5’末端 DNA，相当于 1 μg 的 PCR 产物(3kb 大小)。

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