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货号 | A-PJ1084 | 分类 | miRNA检测系列 |
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规格 | 25T 、100TX20μl | 品牌 | 抚生 |
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
产品介绍:
一步法miRNA反转录试剂盒
描述:由于 miRNAs 分子序列较小,仅 20nt 左右,没有 真核生物有的 Poly(A)尾巴结构,采用传统 Oligo dT 引 物和随机引物很难获得从 miRNA 到 cDNA 的反转录产 物。 公司开发出一套全新的加 A 法 miRNA 反转 录试剂盒,基于 Peter 改良的 miR-Q 技术, 可以对成熟的 miRNA 同时完成加 A 反应和反转录反应, 直接获得含有特异性 tag 和 15(T)的 cDNA 产物(如图 1 所示)。该方法使得 miRNA 反转录与 mRNA 的反转录一 样轻松。直接将提取的 miRNA 与反应缓冲液混合物混合, 并置于 PCR 仪上 1 小时即可获得高浓度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 产物。获得的 cDNA 产物适用于 HG miRNA 荧光定量 PCR 试剂盒进行定量检测,该方法 已被大量文献所采用。
储存:请置于-20°C,可保存 2 年;避免反复冻融
操作方法
1. 按以下组分配制反转录反应液
miRNA(0.01-0.1 μg)or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特别说明: 10×miRNA RT Primer 引物为
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’,定量扩增
用特异性上下游引物进行扩增,图 2 是以 hsa-miR-21 为
实例说明特异性上下游引物的设计方法
2. 在 PCR 仪上按以下条件进行反应:
37°C 60min
95°C 5min
3. 获得 cDNA 产物后使用 HG miRNA 荧光定量 PCR 试剂盒进行 miRNA 定量检测。
公司正在出售的产品:
锌指/环指蛋白4封闭多肽 | 黄芩染料法PCR鉴定试剂盒 |
丙型副伤PCR试剂盒 | 补体因子IELISA试剂盒 |
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人分泌型磷脂meiA2(sPLA2)试剂盒elisa | 胞裂蛋白6ELISA试剂盒 |
人甲状旁腺激su1-34(PTH 1-34)抗体ELISA检测试剂盒 | 甘露聚糖结合凝集su丝氨suan肽1ELISA试剂盒 |
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溶质载体家族蛋白17成员A2封闭多肽 | 人Her/neu基因PCR检测试剂盒 |
B淋巴细胞新型蛋白1封闭多肽 | 禽传染性支气管炎病毒PCR检测试剂盒 |
重组鸡MIER3L蛋白 | 斯氏毛滴虫PCR检测试剂盒 |
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背根神经节同源蛋白DRGX封闭多肽 | 一步法miRNA反转录试剂盒人类嗜淋巴细胞病毒型PCR检测试剂盒 |
脂蛋白受体相关蛋白/低密度脂蛋白相关蛋白的相关蛋白1封闭多肽 | 人多瘤病毒9 PCR试剂盒 |
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