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货号 | A-PJ1111 | 分类 | 蛋白相关 |
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规格 | 1000U | 品牌 | 抚生 |
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
产品介绍:
rTEV蛋白酶rTEV 蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识别 Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。该酶经 6×His 标签纯化而得(含组氨标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过 Ni-NTA Resin )去除。该酶在 4℃-30℃温度、pH 范围(6.0-8.5)反应条件下均具有活性(见下表)。
活性定义:在 1×rTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA,1mM DTT),30℃反应 1h,剪切>85%的 3 μg 底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
应用:融合蛋白标签剪切去除。
储存:长期储存-70℃,可储存 2 年,-20℃可储存 6 个月。
操作方法
1. 在 EP 管中配制如下反应体系
融合蛋白 20 μg
20×rTEV Buffer 7.5 μl
0.1M DTT 1.5 μl
rTEV Protease 1-3 μl
ddH20 Up to 150 μl
2. 30℃孵育,在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液,置于单独的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 30 μl 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸 5 min,取 40 μl 进行SDS-PAGE 分析。
5. 如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于 4℃,请延长反应时间,并增加 rTEV 酶用量。
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