6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit 返回列表页

描述：本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系 5×Fast RT MasterMix 进行 RNA 的反转录反应，使用时只需加入模板、 引物和 RNase Free H2O 即可，大大简化了操作过程、提高 了效率、减少了操作过程中的人为误差。 该预混体系包含快速 MLV7 反转录酶、dNTP、反应 Buffer 和 RNase Inhibitor。该试剂盒采用的 MLV7 反转录酶 具有以下特性：RNase H 活性缺失，从而避免反转录过程中 降解 RNA；经过突变文库筛选，使得其热稳定性更强，可耐 受 50℃ 高温反应，在 60℃ 条件下仍然具有 30%以上活性， 利于打开 RNA 二级结构，从而提高复杂 RNA 模板的扩增性 能；含有快速合成结构域，将 MLV 的延伸速度提高了 3-4 倍，因此适用于快速反转录反应；优化的反转录 Buffer 系统， 可以获得更高产量的 cDNA，从而提高后续检测的灵敏度。 合成的第一链 cDNA 可广泛用于 2nd Strand 的合成、杂交、 PCR 扩增、Real-Time PCR 反应等。

应用：
（1）该制品可有效反转录 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
（2）该制品不可反转录 microRNA
组分

储存：请置于-20°C，可保存 3 年；避免反复冻融。
1. 按以下组分配制反转录反应液
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
5×Fast RT MasterMix 4 μl
*20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*注：反转录引物可根据需要改用特异性引物。
2.反应程序
 50°C 5 min（cDNA 合成）
 95°C 1 min（失活 MLV）
3. 采用 0.25-2μl 反转录产物，作为后续定量 PCR 或 PCR的扩增模板即可。