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223次elisa检测试剂盒样本收集及保存纪宁生物提几点建议:
1.严重溶血,以HRP为标记的ELISA测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性;
2.混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应:
3.标本凝固不全,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;
4.采血试管洗涤不*、反复使用易交叉污染:塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
实验需求留意问题
1.样品稀释
一般产品的样品稀释倍数均经过很多实验断定,以确保实验的灵敏度和特异性.酶联免疫反响是一种敏感性很高的反响,如果血清不稀释,不行防止会发生很强的非特异性反响,呈现假阳性.
2.试剂盒平衡
Elisa中一切试剂和板条均应在实验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时刻太短会形成试剂混匀不行,样品孵育时刻相对缩短,ELISA反响不行充沛.冬天室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.
3.显色
显色必定要操控时刻,依据试剂盒阐明操作即可.一般来说,显色时刻过短,成果偏低;显色时刻过长,空白增高或许非特异性显色添加.
4.比色
比色要留意波长的挑选.以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而前者比色波长为450nm,后者为492nm,滤光片需依据要求随时替换.因而,简单呈现滤光片错用的问题.
5.样品和试剂的混匀
在稀释前、后的样品有必要充沛混匀,一切试剂在加样前也须摇匀,以确保实验的均一性.
6.加样
加样是一项很重要的过程.加样不行太快,要防止加在孔壁上部,不行溅出和发生气泡.加样太快,无法确保微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.
7.温育
温育是ELISA测定中影响测定胜败zui为要害的一个要素.ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反响在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原*结合,有必要在必定的温度条件下反应必定的时刻.
8.洗板
固相免疫测定技能是一种非均相免疫测定技能,需以洗刷操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反响温育过程中吸附的非特异成份别离开来,以确保ELISA测定的特异性.洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,必定要大力拍干;及时替换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸必定要弃去,不然可能影响实验成果.
elisa检测试剂盒小鼠干燥综合征抗原B(SSB)ELISA试剂盒 ,英文名: SSB ELISA Kit
小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒 ,英文名: IP-10/CXCL10 ELISA Kit
小鼠干扰素调节因子5(IRF5)ELISA试剂盒 ,英文名: IRF5 ELISA Kit
小鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 ,英文名: HL ELISA Kit
小鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)ELISA试剂盒 ,英文名: L-FABP ELISA Kit
小鼠肝细胞生长因子激活物(HGFAC)ELISA试剂盒 ,英文名: HGFAC ELISA Kit
小鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 ,英文名: HGF ELISA Kit
小鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 ,英文名: TG ELISA Kit
小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)ELISA试剂盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
小鼠甘露糖结合凝集素(MBL)ELISA试剂盒 ,英文名: MBL ELISA Kit
小鼠钙卫蛋白(CALP)ELISA试剂盒 ,英文名: CALP ELISA Kit
小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA试剂盒 ,英文名: CCB ELISA Kit
小鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒 ,英文名: CAM ELISA Kit
小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 ,英文名: CR ELISA Kit
小鼠钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒 ,英文名: sIgA ELISA Kit
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: sPLA2 ELISA Kit
小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒 ,英文名: PARC/CCL18 ELISA Kit
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