细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体 返回列表页

抗体制备过程：
1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

​
单抗的制备过程：
1.动物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞：与培养好的骨髓瘤细胞混合，人工诱导细胞融合。
3.细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选：HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。（含次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一种培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关，骨髓瘤细胞遗传缺陷型，不能利用，被淘汰）
5.培养杂交瘤细胞：体外培养杂交瘤细胞，从培养液中分离提取单克隆抗体。或者，将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内，从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化
​
实验原理 :
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。
（4）产品仅用于科研可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
单克隆抗体：
1.概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用：
（1）诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
（2）药物导向治疗：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成
（3）分离和纯化抗原分子。
甲苯胺蓝-DNA琼脂脂肪细胞培养基表皮角化细胞ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相关基因（抗原）

卵黄甘露高盐琼脂基础前脂肪细胞培养基真皮成纤维细胞fgL2 (Fibrinogen-like 2)  凝血酶原酶 (又称：纤维介素蛋白；前凝血素)

改良Giolitti-Cantoni 肉汤前脂肪细胞分化培养基软骨细胞FLIP S/L peptide  凋亡调节基因之一（多肽抗原）

Vogel–Johnson 琼脂基础间充质干细胞培养基破骨细胞FoxP3  叉头蛋白3-T细胞转录因子（多肽抗原）

哥伦比亚CNA琼脂间充质干细胞成骨细胞分化培养基皮肤肥大细胞GAD-65 (glutamate decarboxylase)  谷氨酸脱羧酶-65(抗原)

碱性蛋白胨水（APW）间充质干细胞脂肪细胞分化培养基前脂肪细胞GAP-43 ( Growth associated protein-43 )  生长相关蛋白-43（抗原）

碱性蛋白胨水（APW）平滑肌细胞培养基成骨细胞Gastrin  胃泌素（抗原）

碱性蛋白胨水（APW）神经细胞培养基脑动脉血管内皮细胞AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase)  α－甲基酰基辅酶A消旋酶抗原

Melamine/Biotin  生物素标记兔抗三聚胺IgG过敏毒素C3（补体C3）2,5-二甲氧基二Rat Hp-IgM (Helicobacter Pylori IgM) 检测试剂盒

GHR /FITC  荧光素标记生长激素受体IgG癌胚抗原相关细胞粘附分子1-甲基-L-组氨酸Rat PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) 检测试剂盒

Ghrelin/FITC  荧光素标记脑肠肽（一种新的生长激素释放肽）IgG细胞质多聚腺苷酸结合蛋白11-甲基-L-组氨酸Rat PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ) 检测试剂盒

GHRF/GHRH /FITC  荧光素标记生长激素释放激素因IgG半胱氨酸蛋白酶抑制剂71-甲基-L-组氨酸Rat PPAR-α (Peroxisome Proliferators Activator Receptors alpha) 检测试剂盒

GIP/FITC  荧光素标记胃泌素抑制肽IgG22号染色体开放阅读框29BOC-L-4-氨酸Rat PI Ab-IgG/IgM (Phosphatidylinositol Antibody IgG/IgM) 检测试剂盒

TNFRSF18/FITC  荧光素标记糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体IgG神经细胞表面蛋白F3BOC-L-4-氨酸Rat P-PKC (Phospho Protein Kinase C) 检测试剂盒

GIG8/ID2/FITC  荧光素标记DNA结合抑制因子2IgG组织蛋白酶CBOC-L-4-氨酸Rat PERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) 检测试剂盒

Glasses Snake poison Protein/FITC  荧光素标记抗眼镜蛇蛇毒蛋白（眼镜蛇）IgG半胱胺酸蛋白酶蛋白-4双(三环己基磷)钯(0)Rat PIKBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF-KBα) 检测试剂盒
细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体多孢霉Mouse ITGB3 (Integrin Beta 3)  Kit

诺尔斯氏链霉Mouse MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β)  Kit

乳酸乳球乳亚种Mouse MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5)  Kit

棘托竹荪Mouse MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor)  Kit

假苍白杆Mouse H4 (Histone H4)  Kit

臭曲霉Mouse MHCI/H-2Ⅰ(Major Histocompatibility ComplexⅠ)  Kit

*枯草芽胞杆Mouse MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ(Major Histocompatibility Complex-Ⅱ)  Kit

球色单隔孢属Mouse MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ(Major Histocompatibility Complex-Ⅲ)  Kit
多克隆抗体定制：
当机体受到抗原刺激后, 产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物,称为多克隆抗体。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点，产品仅用于科研被广泛应用于免疫学诊断领域,。
（1）IgG ：血清中含量，因此是重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 还能激活补体，结合并增强巨噬细胞的吞噬功能（调理作用和 ADCC 效应），穿过胎盘，保护胎儿及新生婴儿免受感染。
（2）IgA ：分单体和双体两种。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。
（3）IgM ：是分子量大，体内受感染后早产生的抗体，具有很强的激活补体和调理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于诊断早期感染。
（4）IgD ：主要存在于成熟 B 细胞表面，是 B 细胞识别抗原的受体。
（5）IgE ：血清中含量少的抗体，某些过敏性体质的人血清中可检测到，参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。