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货号 | BJ-0161161-2 |
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商品介绍:
测定意义: DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。 测定原理: DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成有色物质,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。 需自备的仪器和用品: 天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。 |
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
二胺氧化酶(DAO)测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | BJ-0161161-2 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
胚胎干关键蛋白抗体长双歧杆菌番茄红su502-65-8
生长抑su受体4抗体酿酒酵母丹皮甙72520-92-4
Smad4抗体Edaphobacter sp.dimethylcurcumin52328-98-0
Smad7抗体根瘤菌属苦玄参苷IV184288-35-5
Shh信号转导通路膜蛋白受体抗体胶孢烯26146-27-0规格
前列腺跨膜上皮1抗原抗体醋杆菌属蓝萼香茶菜甲su79498-31-0
雌激su调节蛋白LIV1/锌转运蛋白抗体Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins 二氢白屈菜红6880-91-7
垂体肿瘤转化基因抗体病研所芽孢杆菌4-羟基156-38-7
猪水肿su(O139)菌体蛋白抗体米曲霉平展变种4,4'- methylenediphenol620-92-8
S-腺苷蛋an酸脱羧酶抗体姬松茸1号*人参皂苷RK2494753-69-4
5-羟色受体2B抗体木霉黄腐酚569-83-5
激活基因8抗体尖镰孢白皮杉3葡萄糖苷94356-26-0
平滑肌肌球蛋白重链抗体猪链球菌分型血清参考品 血清型 SS1817羟基sprengerinin C1029017-75-1
新型血小板相关血管内皮分泌蛋白SCUBE1抗体毛地黄皂苷11024-24-1规格
双链RNA结合蛋白Staufen抗体苏云金芽胞杆菌以色列亚种印度枸橘su13710-70-8
二胺氧化酶(DAO)测试盒可见分光光度法酪an酸激酶2(Tyk-2)试剂盒 Anti-FLT1 Antibody磷酸化信号转导和转录激活因子5a
黑su瘤缺乏因子2(AIM2)试剂盒Anti-FLT1 Antibody抗表面S蛋白
自噬基因(BECN1)试剂盒 Anti-FLT1 Antibody突触su/突触相关蛋白-1
β干扰su(IFN-β)试剂盒Anti-FLT1 Antibodysu
嗜酸性白血球相关之RNA水解酵su家族成员1(EAR1)试剂盒 Anti-FLT1 Antibody可溶性载质转运蛋白22A17
骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)试剂盒 Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody磷酸化Src原癌基因
肿瘤坏死因子配体超家族成员14(TNFSF14)试剂盒Anti-FLT1 AntibodySH2结构含磷酸肌SHIP1
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