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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
6号染色体开放阅读框140抗体 | C6orf140 | BJ-K8071 |
单抗的制备过程:
1.动物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞:与培养好的骨髓瘤细胞混合,人工诱导细胞融合。
3.细胞融合:淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选:HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。(含次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一种培养基,其中三种成分与细胞DNA合成有关,骨髓瘤细胞遗传缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培养杂交瘤细胞:体外培养杂交瘤细胞,从培养液中分离提取单克隆抗体。或者,将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内,从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)产品仅用于科研可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
单克隆抗体:
1.概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用:
(1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
(2)药物导向治疗:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成
(3)分离和纯化抗原分子。
Columbia agar base 哥伦比亚琼脂基础人肾小球内皮细胞裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基酸 盐酸盐Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原
Count agar sugar free acc.to FIL-IDF 无糖计数琼脂人肾近曲小管上皮细胞裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基酸 盐酸盐TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲状腺素受体(抗原)
CT-supplement CT吡啶剂人肾皮质上皮细胞裂解物3-胍基-L-氨酸盐酸盐TY3H ( Tyrosine Hydroxylase ) 酪氨酸羟化酶(抗原)
CZAPEK-DOX agar 查贝克-多克斯琼脂人肾上皮细胞裂解物3-胍基-L-氨酸盐酸盐Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)
DCLS agar Deoxycholate citrate lactose sucrose agar人肾系膜细胞裂解物2,5-二甲氧基苯硫酚Cav-1/ETM1 peptide 细胞质膜微囊蛋白-1抗原
脱氧胆盐柠檬酸盐乳糖蔗糖琼脂人膀胱平滑肌细胞裂解物2,5-二甲氧基苯硫酚Beta-catenin/ Beta-cats β-连环蛋白抗原(β-β链接素)
Deoxycholate lactose agar 脱氧胆盐乳糖琼脂人尿道上皮细胞裂解物2,5-二甲氧基苯磺酰氯p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 磷酸化β-连环蛋白抗原
Dermatophyte slective agar(DTM) 皮真菌选择琼脂人膀胱基质成纤维细胞裂解物2,5-二甲氧基苯磺酰氯Tubulin- Beta 微管蛋白(抗原)
HSP-47/FITC 荧光素标记热休克蛋白-47蛋白IgG磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl溴五氟苯Rat TECK (Thymus Expressed Chemokine) 检测试剂盒
HSP-60/FITC 荧光素标记热休克蛋白-60蛋白IgG磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl溴五氟苯Rat TG (Thyroglobulin) 检测试剂盒
HSP-70/FITC 荧光素标记HSP-70蛋白IgG9号染色体开放阅读框75溴五氟苯Rat HDAC2 (Histone Deacetylase 2) 检测试剂盒
HSP75/TRAP-1 /FITC 荧光素标记热休克蛋白-75IgGCD4双(二叔丁基苯基膦)二氯化钯(II)Rat GPC3 (Glypican 3) 检测试剂盒
OMPC/OMPA/FITC 荧光素标记抗大肠杆菌外膜孔道蛋白CIgG血小板糖蛋白GPIb苯乙基酸Rat HDAC1 (Histone Deacetylase 1) 检测试剂盒
HSP-90 Alpha/FITC 荧光素标记HSP-90α蛋白IgG蛋白精氨酸N甲基4苯乙基酸Rat TSH (Thyroid Stimulating Hormone) 检测试剂盒
HSP-90 Alpha/FITC 荧光素标记热休克蛋白90αIgG磷酸化蛋白精氨酸N甲基42,6-二溴-4-氟苯酚Rat COL3α1 (Collagen Type III Alpha 1) 检测试剂盒
HSP-90 Beta/FITC 荧光素标记HSP-90β蛋白IgG磷酸化周期素依赖性激酶62,6-二溴-4-氟苯酚Rat TEF (Thyrotroph Embryonic Factor) 检测试剂盒
6号染色体开放阅读框140抗体植物类诺卡氏Mouse SESN3 (Sestrin 3) Kit
短密青霉Mouse SOX3 (Sex Determining Region Y Box Protein 3) Kit
大肠埃希氏杆Mouse SHBG (Sex Hormone-Binding Globulin) Kit
香菇Mouse SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) Kit
扩散炭层Mouse SIGLEC12 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 12) Kit
毛栓孔Mouse SRP10 (Signal Recognition Particle 9kDa) Kit
泡囊短波单胞Mouse STAT1 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 1) Kit
乳酸乳球乳亚种Mouse STAT2 (Signal Transducer And Activator Of Transcription 2) Kit
多克隆抗体定制:
当机体受到抗原刺激后, 产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物,称为多克隆抗体。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,产品仅用于科研被广泛应用于免疫学诊断领域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 还能激活补体,结合并增强巨噬细胞的吞噬功能(调理作用和 ADCC 效应),穿过胎盘,保护胎儿及新生婴儿免受感染。
(2)IgA :分单体和双体两种。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,体内受感染后早产生的抗体,具有很强的激活补体和调理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于诊断早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 细胞表面,是 B 细胞识别抗原的受体。
(5)IgE :血清中含量少的抗体,某些过敏性体质的人血清中可检测到,参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。
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