当前位置:上海邦景实业有限公司>>生化检测试剂盒>>辅酶Ⅰ系列>> NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法
货号 | BJ-016112-2 |
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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | BJ-016112-2 |
商品介绍:
测定意义: NADK(EC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。 测定原理: NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH;NADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
热休克蛋白75抗体布鲁氏菌 生物Ⅱ型EJ(人膀胱癌)
肿瘤血管内皮标志物8抗体盘长孢状盘孢U-87 MG(人神经胶质瘤)
四分子交联体15抗体(四旋蛋白)副猪嗜血杆菌HKC(人胚肾上皮)
腱调蛋白抗体(软骨调节素样1蛋白)粉红单端孢霉Hce-8693(人盲肠腺癌(未分化))
血栓素A2受体抗体Oerskovia enterophilaH4-II-E-C3(大鼠肝癌 )
Toll样受体11抗体意大利酵母RSC96(大鼠雪旺)
血小板反应蛋白抗体布鲁氏菌 生物Ⅴ型MS751(人颈表皮癌)
端粒酶相关蛋白2/端粒酶逆转录酶抗体金链霉菌(生金色链霉菌)INS-1(大鼠胰岛瘤)
血小板反应蛋白2/酶敏感蛋白2抗体无FO(小鼠骨髓瘤)
四分子交联体17抗体(四旋蛋白)圆酵母属CEM/C1(人急性淋巴白血病)
髓系触发受体1抗体白色弯曲嗜酸菌Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β)
紧密连接蛋白2抗体赤霉属A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌)
磷酸化埃兹蛋白抗体大肠埃希氏菌SW480(人结肠癌)
单克隆抗体枝状枝孢RKO(人结肠腺癌)
微管相关蛋白α6抗体节杆菌QGY-7701(人肝癌)
NAD激酶(NADK)测试盒可见分光光度法组织转谷氨酰酶(TGM2)试剂盒Anti-CFLAR Antibody前列腺特异性G蛋白偶联受体/嗅觉受体51E2
表面活性物质关联蛋白J(SPJ)试剂盒Anti-CFL2 AntibodyG蛋白偶联嘌呤受体p2y11
Smad同源物4 (Smad4/MADH4)试剂盒 Anti-CFP AntibodyG蛋白偶联嘌呤受体p2y12
表皮生长因子受体2(EGFR2)试剂盒Anti-CHAT AntibodyG蛋白偶联嘌呤受体p2y8
骨骼肌快肌肌钙蛋白I(TNNI2)试剂盒Anti-CGRPR(CALCRL) AntibodyG蛋白偶联嘌呤受体p2y9
肽酰脯氨酰异构酶/亲环素样蛋白1(PPIL1)试剂盒Anti-CHAT Antibody蛋白氨酸磷酸酶相互作用蛋白51
骨成型蛋白4 (BMP-4)试剂盒 Anti-CHAT Antibody内皮纤溶酶原激活抑制蛋白1
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