柠檬酸合酶(CS)测试盒微量法 返回列表页

商品介绍:

特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。

测定步骤：

1、 酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。

3、 工作液配制：在试剂一加入100μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。

5、 样本测定（在96孔板中依次加入下列试剂）充分混匀，室温静置30min后，450nm处测定各管吸光值A。

注意事项：

待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕，其中的WST-8需要在使用时适当分装，以避免反复冻融导致的检测效果下降。

标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时，标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释；当样品为血液等无需处理的样品时，宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。

抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

优点如下：

1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。

3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。

4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

5、再现性好：变异系数CV=1.7%。

6、回收试验： X =103.3%。

7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。

磷酸化x激酶A抗体褐黄鳞锈耳MDCK（犬肾）

磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体黑木耳HT-29（人结肠癌）

磷酸化非受体酪酸蛋白激酶2抗体尖孢镰孢K-562（人慢性骨髓性白血病）

磷酸化钙调节蛋白-1抗体葡萄座腔菌HCC827（人非小肺癌）

磷酸化CREB转录共激活因子TORC2抗体同丝毛壳FaDu（人咽鳞癌）

酪酸酶相关蛋白2抗体壮丽假丝酵母Hep G2（人肝癌）

TWIST蛋白抗体江西青霉KG-1（人急性骨髓性白血病）

磷酸化羟化酶抗体Pseudoclavibacter caeni SrinivasanL6（大鼠成肌）

拓普西异构酶Ⅰ抗体土曲霉P3X63Ag8（小鼠骨髓瘤）

肾小管间质肾炎抗原抗体尖孢镰刀菌I型胶原酶（含100mL酶解缓冲液）

跨膜蛋白176A抗体血红密孔菌3T3-L1（小鼠胚胎成纤维）

跨膜蛋白176A抗体巨兽芽孢杆菌木瓜蛋白酶（含10mL酶解缓冲液）

转录因子Tbx3抗体哈茨木霉293T（人胚肾）

tinagl1抗体茶树菇III型胶原酶（含10mL酶解缓冲液）

辣椒素受体5抗体斑玉蕈IV型胶原酶（含10mL酶解缓冲液）
柠檬酸合酶(CS)测试盒微量法游离血红蛋白(f-Hb)试剂盒  Anti-CLK2 Antibody蛋白激酶C zeta

Apelin 17(AP17)试剂盒  Anti-CLPP Antibody嗜酸性粒颗粒关键碱性蛋白

膜联蛋白A5(ANXA5 )试剂盒  Anti-CLPX Antibody胰岛素原

果糖二磷酸缩酶C(ALDOC)试剂盒 Anti-CLOCK Antibody原蛋白转化酶4

血栓烷受体(TP/TXA2R)试剂盒Anti-CLPB Antibody膜钙ATP酶1

性结合球蛋白(SHBG)试剂盒Anti-CLPX Antibody磷酸烯酮酸羧激酶

C4结合蛋白(C4BP)试剂盒 Anti-CLPX Antibody多聚合酶α