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细胞冻存步骤： 
   待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml*培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤：    将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
公司产品仅用于科研
产品名称：猪肾细胞
产品英文代号：PK-15

细胞培养条件：MEM+10%FBS+1%P/S  

生长状态：贴壁生长

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

是否提供细胞STR鉴定：不提供STR鉴定报告

保存培养温度（℃）：37

运输温度（℃）：常温

运费基数：活细胞包邮/冻存100-400元干冰费

稳定货期（是or否）：     是

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细胞培养及传代：
<1>细胞培养
产品仅用于科研细胞请于细胞培养箱中培养，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不行，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的培养基及培养条件；
细胞于培养瓶或皿中培养，加入适量说明书上标注的细胞相应*培养基（一般液面高度2-3mm即可）。
<2>细胞传代（以下步骤适用于10cm皿）
细胞培养至密度达80%以上时即可传代，先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好，其他培养基全部吸干舍弃；
培养皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入培养箱中消化；
3min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞不再贴壁，即可加入*步收集的培养基混匀；
若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至不贴壁为止；
将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同培养皿中，补加新培养基后放回培养箱培养。
<3>相关问题
部分细胞在传代后时，会有以下现象：细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、培养基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时，可以咨询本公司技术人员此现象是否正常及相关处理方式，不要频繁换液，大多数细胞1周换液2-3次即可。
细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效改善。
传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前培养所使用的培养基，会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险。
细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度。
请不要随意更换培养基，因实验需要，可以逐步驯化。
悬浮传代：混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm离心3min，弃上清。再加5ml PBS重悬细胞，再离心后，用*培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗一次。 ​

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
产品仅用于科研在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　豇豆慢生根瘤菌　1g

Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　酿酒酵母　5g

表面活性物质关联蛋白J(SPJ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　蜡状芽孢杆菌　100mg

白介素25(IL25)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　弗氏志贺氏菌　1g

可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　50%水溶液,含0.1 %甲酸稳定剂　美澳型核果褐腐病菌　100g

ⅩⅤ型胶原(COL15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　50%水溶液,含0.1 %甲酸稳定剂　藤黄微球菌　500g

细胞外基质蛋白1(ECM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　BF3:17.5 - 19.0 %　单核增生李斯特CMCC(B)54002　100ml

封闭蛋白3(CLDN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　95%　绿穗霉　25g

封闭蛋白5(CLDN5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　95%　尼氏芽孢杆菌　5g

多胺调节因子1结合蛋白1(PMFBP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　99%　汉逊德巴利酵母fabryi变种　1g

载脂蛋白O(APOO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　99%　香菇(泌阳3号)　5g

纤维鞘相互作用蛋白1(FSIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　球孢白僵菌　100g

连接附着分子3(JAM3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　平脐蠕孢菌　25g

连接附着分子1(JAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　98%　空泡极单胞菌　5g

中间丝蛋白(SYNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　96%　产气肠杆菌（现1）　25g

抵抗素样蛋白β(RETNLβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　96%　布鲁氏菌　5g

毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　AR,98%　不规则盐海菌　1g

毒蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)　AR,98%　金针菇（毛柄金钱菌、冬菇）　25g
猪肾细胞厂家人脑动脉血管平滑肌Human Brain: Normal Cerebral Artery Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives人脑动脉血管平滑肌细胞提取物是从人原代脑动脉血管平滑肌细胞提取的，人原代脑动脉血管平滑肌细胞从正常人脑动脉血管平滑肌组织制备。正常人脑动脉血管平滑肌组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒 Phospho-Met (Tyr1349) (130H2) Rabbit mAb100 ul

人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒 α-Actinin Antibody100 ul

人叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒Phospho-Met (Tyr1003) (13D11) Rabbit mAb20 ul

人抗钙蛋白酶抑素抗体(AT-DⅣ)ELISA试剂盒Phospho-Met (Tyr1003) (13D11) Rabbit mAb100 ul

人抗菌肽(Att)ELISA试剂盒 CDK6 (DCS83) Mouse mAb20 ul

人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒CDK6 (DCS83) Mouse mAb100 ul

人心纳素(ANF)ELISA试剂盒 Phospho-Ack1 (Tyr284) Antibody100 ul

人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)ELISA试剂盒Acidic FGF (11H11) Rabbit mAb100 ul