当前位置:上海邦景实业有限公司>>生化检测试剂盒>>氧化与抗氧化系列>> 丙二醛(MDA)测试盒微量法
货号 | BJ-0161153-1 |
---|
商品介绍:
测定意义: 氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。 测定原理: MDA与硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有最大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
丙二醛(MDA)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-0161153-1 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
装配衔接蛋白180抗体叶球鞘氨单胞菌RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5100mL
液泡蛋白分选受体SORCS抗体类肺炎克雷伯氏菌类肺炎亚种Oligo(dT) 纤维su25mg
滑膜肉瘤X染色体相关2抗体松口蘑RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL
突触相关蛋白102抗体速生杆菌柱式鼠尾 DNAout50 次规格
PSD95结合蛋白3抗体大豆慢生根瘤菌百万基级细菌 (G+)DNAout10 次
肺表面活性蛋白C抗体枯草芽胞杆菌枯草亚种RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0100mL
5-羟色受体1D抗体大豆慢生根瘤菌RNA 级 Oligo(dT) 纤维su25mg
5-羟色受体1E抗体稀褶黑菇RNA 级 Guanidium HCl ( 盐酸胍 )100g
5-羟色受体1F抗体平菇磁珠植物 DNAout50 次规格
5-羟色受体2A抗体两歧双歧杆菌柱式血液 DNAout200 次规格
5-羟色受体2B抗体立枯丝核菌柱式粪便 DNAout50 次
5-羟色受体3A抗体短波单胞菌属柱式凋亡 DNAout50 次规格
5-羟色受体3D+3E抗体酿酒酵母柱式酱油 DNAout10 次
5-羟色受体3D抗体酿酒酵母M13 噬菌体单链基因组 DNAout50 次
5-羟色受体4抗体坟墓节杆菌液体样品 DNAout50 次
丙二醛(MDA)测试盒微量法生长分化因子11(GDF11)试剂盒Anti-FABP2 AntibodyRad52
膜桥蛋白(Ponticulin)试剂盒 Anti-FABP1 Antibody(PB0644)环指蛋白150
血管紧张suII (ANG II)试剂盒 Anti-FABP2 AntibodyT特异性趋化因子
蛋白质二硫键异构酶(PDI)试剂盒Anti-FABP2 Antibody晚期糖基化终末产物特异性受体
电子转移黄su蛋白β肽(ETFβ)试剂盒 Anti-FABP2 Antibody环指蛋白12
胎盘性磷酸酶(PLAP/ALPP)试剂盒 Anti-FABP2 Antibody环指蛋白113B
胃蛋白mei(PP)试剂盒Anti-FABP2 Antibody环指蛋白165
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。