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抗体的生活习性:
(1)结合特异性抗原:抗体与其他免疫球蛋白分子区别,就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合,在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体:抗体与相应抗原结合后,借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)产品仅用于科研具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
详细介绍:
产品名称 | 肥大细胞羧肽酶A3抗体 |
英文名称 | CPA3 |
货号 | BJ-K8143 |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。产品仅用于科研保存前需经除菌并添加防腐剂。
Triple Sugar Iron Agar人真皮成纤维细胞-新生儿总RNA硫酸钐(III)EBNA-3 (Epstein barr nuclear aigens 3) EB病编码核蛋白-3
赖氨酸铁琼脂人真皮成纤维细胞-成人总RNA4-羟基-3-甲酸甲酯ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 内皮素转化酶1抗原
Lysine Iron Agar人毛细胞总RNA4-羟基-3-甲酸甲酯ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 内皮素转化酶2抗原
月桂胰胨肉汤人生发基质细胞总RNA3-羟基-2-硝基吡啶ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原
Lauryl Sulfate Broth人外根壳细胞总RNA3-羟基-2-硝基吡啶ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚层发育不良抗原
亮绿胆盐肉汤人内根壳细胞总RNA四(三基膦)镍rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子
Brillia Green Bile 2%人淋巴内皮细胞总RNA四(三基膦)镍EGF(Epidermal growth factor)rat 重组表皮生长因子抗原(大鼠)
EC肉汤人淋巴成纤维细胞总RNA2,6-二氟吡啶EGFL7(EGF-like domain coaining protein 7) 类表皮生长因子域7抗原
Phospho-IRF3 (Ser396)/FITC 荧光素标记磷酸化干扰素调节因子3IgG11号染色体开放阅读框71双(1,5-环辛二烯)四氟酸铱(I)Rat DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) 检测试剂盒
IRF-4/FITC 荧光素标记干扰素调节因子4IgG11号染色体开放阅读框74双(1,5-环辛二烯)四氟酸铱(I)Rat EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) 检测试剂盒
IRF7 /FITC 荧光素标记干扰素调节因子7IgG12号染色体开放阅读框43-甲酰氨酸Rat PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide) 检测试剂盒
Phospho-IRF7 (Ser471/472) /FITC 荧光素标记磷酸化干扰素调节因子7IgG12号染色体开放阅读框243-甲酰氨酸Rat 5-HETE (5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) 检测试剂盒
IRS-1/FITC 荧光素标记胰岛素受体底物-1IgG环核苷酸门控阳离子通道蛋白CNG-1βBoc-L-脯氨酸酰胺Rat CALP (Calprotectin) 检测试剂盒
phospho-IRS1(Tyr895)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1IgGCD30Boc-L-脯氨酸酰胺Rat ANXA5 (Annexin A5) 检测试剂盒
phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1IgG细胞角蛋白19,17,14,42,10对胺Rat GPIb-IX-V (Plaet Membrane Glycoprotein GPIb-IX-V Complex) 检测试剂盒
phospho-IRS1(Ser1101)/FITC 荧光素标记磷酸化胰岛素受体底物-1IgG细胞角蛋白10对at SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) 检测试剂盒
肥大细胞羧肽酶A3抗体黄色短杆Mouse 15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) Kit
大肠埃希氏Mouse /nNOS (Nitric Oxide Syhase 1, Neuronal) Kit
蘑菇轮枝孢Mouse BFP (Brain Finger Protein) Kit
*胜利油田热微球Mouse S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) Kit
黑曲霉Mouse S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) Kit
异配囊接霉Mouse S100A10 (S100 Calcium-binding Protein A10) Kit
热带盐水孢Mouse PLA2G2D (Phospholipase A2, Group IID) Kit
大肠杆Mouse cPLA2 (Phospholipase A2, Cytosolic) Kit
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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