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玉米迪克氏菌保存

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所  在  地上海市

更新时间:2020-12-01 13:33:18浏览次数:196次

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玉米迪克氏菌保存低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

规格参数:
资源名称  玉米迪克氏菌保存
种属: Dickeya zeae

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 天门冬酰胺

培养基: 0002

生长条件: 30℃

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法


仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法:
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件 30℃,好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法:
①简单保存法,产品仅用于科研将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4) 菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
人角膜成纤维细胞基础培养基脑膜炎奈瑟菌拉丁属名: Neisseria meningitidis

人表皮角质形成细胞基础培养基金龟子绿僵菌用途: 生物防治

OptiTDS™小鼠心脏微血管内皮细胞组织解离液谷氨酸棒杆菌拉丁属名: Corynebacterium  glutamicum

PrimaCell™小鼠心脏微血管内皮细胞试剂盒酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

人视网膜色素上皮细胞基础培养基腐生葡萄球菌腐生亚种注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人脂肪细胞基础培养基酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

人表皮黑色素细胞基础培养基喜肌费尔酵母拉丁属名: Fellozyma inositophila

小鼠脑微血管细胞组织处理缓冲液橄榄链霉菌拉丁属名: Streptomyces  olivaceus

小鼠脑微血管细胞*培养基青紫黑链霉菌拉丁属名: Syntrophomonas glaucovioatratus

Primarker™小鼠脑微血管细胞鉴定试剂盒猪链球菌分型血清参考品 血清型 SS34规格: 1ml

PrimaCell™小鼠脑微血管细胞试剂盒乳微杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

OptiTDS™小鼠脑微血管细胞组织解离液小马勃3-2注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

小鼠肺微血管内皮细胞*培养基东方伊萨酵母拉丁属名: Issatchenkia  orientalis

Primarker™小鼠肺微血管内皮细胞鉴定试剂盒冷湖黄杆菌拉丁属名: Flavobacterium psychrolimnae

小鼠脑微血管细胞生长因子少根根霉拉丁属名: Rhizopus arrhizus

FibrOut™小鼠脑微血管细胞成纤维抑制剂解蛋白弧菌拉丁属名: Vibrio proteolyticus
四号琼脂基础      *250No.4 Agar Base

我妻氏培养基基础     *250Wagstsuma Agar Base

60%/L化钠蛋白胨肉汤    *25060%/L NaCl Peptone Water

化钠三糖铁     *250NaCl Triple Sugar Iron Agar

胰胨大豆琼脂斜面(TSA)   *250Tryptic Soy Agar

42℃生长培养基       *25042℃growth Medium

O/F培养基(HLGB)    *250O/F Medium
玉米迪克氏菌保存RAPD引物1克

17372-87-1曙红Y水溶Acid Red 87

ELECTROSNAP8%ELECTROSNAP 试剂盒 8%500MLRT

4-溴-2- 4-Bromo-2-fluoro,99% 51436-99-8 5G 通用试剂

角鲨烯/反式角鲨烯/全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯/鲨烯/三十碳六烯/角鲛油素/鱼肝油萜/2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯/Squalene BR,99% 25毫升 国产/进口

Lead(II)acetatebasic碱式醋酸铅5克CP,98.5%

79-05-0丙酰胺PropionaMide;Propionic acid aMide

potewwiumxy7nogenphthalate本二酸氢钾100克CP,97%

对磺酸钠 p-sulfonic acid sodium salt,95% 657-84-1 50G 通用试剂

溴代十二烷 1-Bromododecane,97% 143-15-7 100G 通用试剂
微生物培养方法:
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,产品仅用于科研可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

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