固氮菌说明书 返回列表页

基本概念：
(1)菌群：由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体，产品仅用于科研具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属：菌种的上一级分类，通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属，如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位，通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体，与同属内其他种有着明显差异；当涉及到细菌保存时，菌种是指细菌的种子（用来长期保存）资源。
(4) 菌型：同一菌种的不同细菌，在某些方面存在较小差异的为同一菌型，通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株：由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代，一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。

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规格参数：
资源名称  固氮菌说明书
种属: Azotobacter│sp.

分离基物: 土壤

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 固氮菌肥

培养基: 65

生长条件: 30℃

存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
仪器设备与器具：
1 恒温培养箱：36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平：感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法：
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ：Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃，15min。
传代方法 ①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无菌水或培养基充分溶解，平板涂布，活化培养。 ②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无菌接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。
生长条件 30℃，好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法：
①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。
微生物培养方法：
1、平板划线分离法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，产品仅用于科研从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的，但平板划线分离法不能对菌落计数，而稀释涂布平板法培养过程复杂，对平板的要求比较高，可参照以下步骤：
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃，向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均匀，然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿，轻轻摇动培养皿，使培养基溶液均匀分布在培养皿底部，待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g，放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇15～20min混合均匀，用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培养基表面的中央位置，用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展，使之分布均匀。
RPMI-1640（不含L-谷氨酰胺）硫磺菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

RPMI-1640（含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES，不含酚红）根瘤菌用途: 固氮

多聚-L-赖氨酸溶液（10×）Leminorella richardii拉丁属名: Leminorella richardii

RPMI-1640（含HEPES）硝孢链霉菌拉丁属名: Streptomyces nitrosporeus

RPMI-1640（含双抗）色串孢属注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

MTT溶液（5mg/mL）噬尼古丁节杆菌拉丁属名: Arthrobacter nicotinovorans

Nanofecter转染试剂直立枝孢注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

MTT溶液（5mg/mL）酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

RPMI-1640（含HEPES、双抗）柴油食烷菌拉丁属名: Alcanivorax dieselolei

0.4%台盼蓝染色液（Trypan Blue Solution）蕈状芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

超滤水，细胞培养级茫崖诺卡氏菌拉丁属名: Nocardia mangyaensis

RPMI-1640泡盛曲霉拉丁属名: Aspergillus awamori Nakazawa

重组人胰岛素溶液（10mg/ml）假芽胞杆菌属拉丁属名: Fictibacillus sp.

Nanofecter转染试剂广岛链霉菌拉丁属名: Streptomyces hiroshimensis

β-巯基乙醇（55mM），1000×天目山类芽孢杆菌拉丁属名: Paenibacillus tianmuensis

MEM氨基酸溶液（50×）边缘假单胞菌用途: 分类、研究，具有处理养殖废水潜力。
5-鸟苷三嶙酸二钠盐25克

10163-15-2单扶酸钠 95%Diwo7ium monofluorophosphate

5-bromo-1,2,3,4-tetraxy7nonepxtxelene 6134-55-0

对硫酚 p-Thiocresol,≥99.0% 106-45-6 25G 多肽试剂

微量可调八道移液器P50shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克
固氮菌说明书SP琼脂糖凝胶FFshēng huà shì jì容量：2～8℃100毫克

624-24-8正戊酸甲酯metxYL VALERATE

沙保弱氏琼脂平板shēng huà shì jì容量：1米

4-异丙基 4-lsopropyl,99% 99-87-6 500ML 通用试剂

胡椒碱/胡椒辣碱/(E,E)-1-5-(1,3-苯并二氧戊环-5-基)-1-氧代-2,4-戊二烯基-/1-(5-(1,3-苯并二氧代-5-基)-1-氧代-2,4-戊二烯基(-(E,E)-/Piperine BR，98%， 5克 国产/进口

戊脉安，英文名或英文缩写：(±)-Verapamil xy7nochloride，级别：超纯，80%，液体，规格：10毫克

固黄0NA

S-本基丁酸，英文名或英文缩写：L-Homopxenylalanine，级别：BR，98%，规格：1克

胆红素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用试剂

已醋醋-顺式-3-己烯酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8