周期素E抗体 返回列表页

免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其*覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
详细介绍：

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抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。产品仅用于科研保存前需经除菌并添加防腐剂。
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抗体的生活习性：
(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。
(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)产品仅用于科研具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
PALCAM Listeria selective-Suppleme acc.to van Netten et al PALCAM人膀胱平滑肌细胞cDNA3-乙烯基酸AU1 tag peptide  AU1 tag标签多肽

李斯特氏菌选择添加剂人尿道上皮细胞cDNA3-乙烯基酸Glu-Glu Tag peptide  Glu-Glu Tag多肽蛋白

L-PALCAM-Listeria selective enrichme broth( base) acc.van Netten et al. L-PALCAM 李斯特氏菌选择富集肉汤（基础）人膀胱基质成纤维细胞cDNA3-乙烯基酸CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2)  环核苷酸阳离子通道蛋白α2抗原

Peptone water( buffered) 缓冲蛋白胨水人前列腺上皮细胞cDNA盐酸金刚乙胺CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase)  C型钠尿肽抗原

Phenol-re broth( base) 酚红肉汤（六亚）人前列腺成纤维细胞cDNA盐酸金刚乙胺CF(Ciliary Neurotrophic Factor)  睫状神经营养因子抗原

Plate cou agar Casein-peptone dextrose yeast extract agar人前列腺平滑肌细胞cDNA3-基酸factor V(Vcoagulation factor)  凝血因子5

平板计数琼脂/酪蛋白右旋糖酵母琼脂人颅骨造骨细胞cDNA3-基酸Collagen III (Ai-Collagen Type III )  抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)

Plate cou skim milk agar平板计数脱脂乳琼脂人滑膜细胞cDNA3-基酸Collagen III (Ai--Collagen Type III )  Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)

IL-15/FITC  荧光素标记白介素15IgG卷曲螺旋结构域蛋白752,4-二氟溴Rat TRF (Transferrin) 检测试剂盒

IL-15R Alpha/FITC  荧光素标记白介素15受体αIgG卷曲螺旋结构域蛋白654-氯-3-氟酚Rat VLDL (Very Low Density Lipoprotein) 检测试剂盒

IL-16/FITC   荧光素标记白细胞介素-16IgG卷曲螺旋结构域蛋白1574-氯-3-氟酚Rat SDH (Succinate Dehydrogenase) 检测试剂盒

IL-16/FITC  荧光素标记白介素16IgG卷曲螺旋结构域蛋白90B4-氯-3-氟酚Rat F1+2 (Prothrombin Fragme 1+2) 检测试剂盒

IL-17/FITC  荧光素FITC标记白介素-17IgG卷曲螺旋结构域蛋白144A4-氯-2-氟酚Rat VASP (Vasodilator Stimulated Phosphoprotein) 检测试剂盒

IL-17B/FITC  荧光素标记白介素-17BIgG卷曲螺旋结构域蛋白1044-氯-2-氟酚Rat DNMT3A (DNA Methyltransferase 3A) 检测试剂盒

IL-17/PE  荧光素PE标记白介素-17IgG卷曲螺旋结构域蛋白12子种绿ARat VAP-1 (Vascular Adhesion Protein 1) 检测试剂盒

IL-17R/IL-17RA/CD217/FITC  荧光素标记白介素17受体IgG卷曲螺旋结构域蛋白67子种绿ARat ApoA1 (Apolipoprotein A1) 检测试剂盒
周期素E抗体肠炎沙门氏Mouse TCF20 (Transcription Factor 20)  Kit  

大肠杆Mouse RB (V-R Reticuloendothiosis Viral Oncogene Homolog B)  Kit

弗氏志贺氏Mouse TRF (Transferrin)  Kit

地衣芽胞杆Mouse TFR2 (Transferrin Receptor Protein 2)  Kit   

产色链霉Mouse TFR (Transferrin Receptor)  Kit

黄曲霉Mouse TGFbI (Transforming Growth Factor Beta Induced)  Kit  

蜡状芽孢杆Mouse TGF-α (Transforming Growth Factor α)  Kit

尖孢镰刀Mouse TGFb2 (Transforming Growth Factor Beta 2)  Kit