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货号 | BJ-0161124-1 |
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商品介绍:
测定意义: FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰fu酶A和丙二酰fu酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。 测定原理: FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。 |
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | BJ-0161124-1 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
囊泡转运蛋白Use1抗体根瘤菌SGC-7901, 人胃腺癌系
上游结合蛋白1抗体苏云金芽孢杆菌肯尼亚亚种U266B1 U266, 人多发性骨髓瘤
内质网膜蛋白UNC93B抗体Paecilomyces formosus人输尿管上皮*培养基
神经突起诱导因子受体UNC5B抗体福氏志贺氏菌人胎盘滋养层*培养基
神经突起生长诱导因子受体UNC5B抗体金顶侧耳B16-F10, 小鼠黑色su瘤高转移
神经突起生长诱导因子受体UNC5D抗体总状共头霉人肾管状上皮*培养基
神经突起生长诱导因子受体Unc5a抗体层出镰刀菌A549/DDP, 人肺腺癌耐药株
二磷酸葡萄糖神经酰葡萄糖基转移酶2抗体平菇COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维
尿酸酶大肠埃希菌RL95-2, 人内膜腺癌系
尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶抗体琼氏不动杆菌WM35, 人黑色su瘤
荆豆凝集su1抗体植物乳杆菌人卵巢微血管内皮*培养基
尿路上皮特异蛋白3抗体科氏葡萄球菌人肝星形*培养基
尿路上皮特异蛋白1a抗体灵芝U-2 OS, 人骨肉瘤
去泛su酶16抗体哈茨木霉BxPC-3, 人原位胰腺腺癌株
整合su结合性信号分子抗体葡萄座腔菌DU 145, 人前列腺癌
脂肪酸合成酶(FAS)测试盒微量法促肾上皮质释放(CRH)试剂盒 Anti-CYGB Antibody染色体浓缩调节蛋白2
凋亡相关因子配体(FASL/TNFSF6)试剂盒 Anti-CYLD AntibodyRho GTP酶激活蛋白GAP
基质金属蛋白mei原13 (Pro-MMP-13)试剂盒Anti-CYGB Antibody视黄结合蛋白
胰岛su样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)试剂盒Anti-CYP11A1 Antibody补体应答基因32
Bκ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(Nfkbie)试剂盒 Anti-CYP11A1 Antibody性蛋白1样蛋白
蛋白二硫化物异构酶A5(PDIA5)试剂盒Anti-CYP11B1 AntibodyE3泛su蛋白连接酶144A
髓鞘相关糖蛋白(MAG)试剂盒 Anti-CYP11B1/C11B2/CYP11B2 Antibody转录调控因子RFX4
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