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货号 | BJ-0161115-1 |
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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | BJ-0161115-1 |
商品介绍:
测定意义: fu酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。 测定原理: 分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。 所需的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
磷酸化微管相关蛋白抗体球孢白僵菌人神经少突起前质胶质*培养基
磷酸化微管相关蛋白抗体黄色篮状菌小鼠肠粘膜上皮*培养基
脱氢胆固还原酶14抗体交角耳大鼠脉络膜血管*培养基
甲状腺su结合球蛋白抗体木耳大鼠关节软骨*培养基
转导suβ1X连锁蛋白抗体叶点霉菌大鼠前脂肪*培养基
内皮suB受体抗体玫烟色棒束孢大鼠小肠粘膜上皮*培养基
转导suβ1X连锁受体蛋白1抗体枯草芽孢杆菌小鼠骨髓基质*培养基
甲状腺受体相关蛋白220抗体樟疫霉大鼠视网膜muller
磷酸化甲状腺受体相关蛋白220抗体平菇大鼠胰腺上皮*培养基
抑癌基因5抗体荧光假单胞菌大鼠胰岛*培养基
脑肿瘤抑癌蛋白1抗体盐水海杆状菌大鼠支气管上皮*培养基
肺癌抑癌蛋白1抗体毛壳菌小鼠胰腺星状*培养基
前列腺癌抑癌蛋白3抗体猪丹丝菌大鼠神经元*培养基
甲状腺激su受体α1抗体禽分枝杆菌大鼠甲状腺上皮*培养基
甲状腺激su受体α1+α2抗体弯曲乳杆菌(更名类干酪乳杆菌)大鼠气管平滑肌*培养基
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒微量法球蛋白A (IgA)试剂盒Anti-CSTB(Cystatin B) Antibodyras癌基因家族Rab9蛋白
STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)试剂盒 Anti-CSTB(Cystatin B) Antibodyras癌基因家族RAB20
促红生成su(EPO)试剂盒Anti-CSTB AntibodyRas样蛋白A+B
脂多糖结合蛋白(LBP)试剂盒 Anti-CTAG1A AntibodyRad51
甲状腺su受体α(THRα)试剂盒 Anti-CTBP1 AntibodyRNA结合蛋白片段Y染色体家族蛋白2
CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)试剂盒Anti-CTBP1 Antibody(PB0400)RNA结合蛋白片段Y染色体家族蛋白1
5脂加氧酶(5-LO)试剂盒 Anti-CTBP2 Antibody(PB0401)RNA聚合酶III
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
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