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褐球固氮菌说明书

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所  在  地上海市

更新时间:2020-12-01 13:49:22浏览次数:139次

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褐球固氮菌说明书低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

规格参数:
资源名称  褐球固氮菌说明书
种属: Azotobacter│chroococcum

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 细菌肥料

培养基: 0003

生长条件: 28℃

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法


仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法:
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件 30℃,好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法:
①简单保存法,产品仅用于科研将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4) 菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
大鼠肺大动脉平滑肌细胞基础培养基短小芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus pumilus

Primarker™小鼠子宫成纤维细胞鉴定试剂盒Vagococcus sp.拉丁属名: Vagococcus sp.

大鼠肺大静脉平滑肌细胞基础培养基杨树细盾霉用途: 植物病原物;用于该类群菌的系统学研究

OptiTDS™小鼠子宫成纤维细胞组织解离液假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas japonica

小鼠子宫成纤维细胞生长因子竹荪属拉丁属名: Dictyophora sp.

大鼠肺动脉成纤维细胞基础培养基球孢白僵菌用途: 鞘翅目天牛属害虫生物防治

大鼠气管和支气管上皮细胞基础培养基松生拟层孔菌拉丁属名: Fomitopsis pinicola

大鼠肺大动脉内皮细胞基础培养基香菇7注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

小鼠子宫成纤维细胞*培养基简青霉拉丁属名: Penicillium simplicissimum

小鼠子宫成纤维细胞组织处理缓冲液土生丛毛单胞菌拉丁属名: Comamonas terrigena

大鼠肺大静脉内皮细胞基础培养基暗产色链霉菌拉丁属名: Streptomyces phaeochromogenes

小鼠卵巢上皮细胞生长因子扁菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

大鼠肺成纤维细胞基础培养基灵芝属注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

大鼠支气管平滑肌细胞基础培养基里亚氏须腹菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

小鼠卵巢上皮细胞组织处理缓冲液Pedobacter拉丁属名: Pedobacter  koreensis

PrimaCell™小鼠子宫成纤维细胞试剂盒大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia  coli
PALCAM添加剂*1mg/支*10PALCAM Supplement

LPM琼脂*250LPM Agar

Half –Fraser 培养基*250Half-Fraser Medium

Half –Fraser 添加剂*5ml*2Half-Fraser Supplement

改良缓冲蛋白胨水(MBP)*250Modified Buffered Peptone Water

EB增菌液*250EB Enrichment Broth

Fraser 培养基*250Fraser Medium
褐球固氮菌说明书RAPIDWESTERNBlottingKitRat-WT快读western blotting试剂盒DRYICE-Fsigma

78-90-01,2-丙二胺;丙二胺;1,2-二基丙烷1,2-PropanediaMine

3,4-二羟基shēng huà shì jì容量:RT5克

4,4-二叔丁基-2,2-联 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3

2,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量:RT100克

2216E琼脂shēng huà shì jì容量:100克

1121-31-92-巯基N-氧化物(+4℃)2-Pyridinethiol 1-oxide

氢钠shēng huà shì jì容量:5克

对苯二甲酰 p-Phthaloyl chloride,≥99.0% 100-20-9 100G 通用试剂

吉马酮 Germacrone (≥98%,HPLC) 6902-91-6 20MG 标准品
微生物培养方法:
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,产品仅用于科研可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

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