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长柄链格孢(斜面)保存

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所  在  地上海市

更新时间:2020-11-22 20:39:22浏览次数:276次

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长柄链格孢(斜面)保存低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,产品仅用于科研具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4) 菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。


规格参数:
资源名称  长柄链格孢(斜面)保存
种属: Alternaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason

分离基物: 油松

提供形式: 斜面培养物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 研究;教学

培养基: 综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。

生长条件: 25℃,好氧

生长特性:
仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法:
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件 30℃,好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
微生物培养方法:
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,产品仅用于科研从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。
豚鼠气单胞菌安全等级1提供形式冻干物,斜面培养物种属Aeromonas caviae

阿萨斯丝孢酵母模式菌株安全等级1种属Trichosporon asahii

黄色毛霉模式菌株安全等级1种属Mucor flavus

巴西青霉模式菌株安全等级1种属Penicillium brasilianum

杀真菌素链霉菌模式菌株yes安全等级1种属Streptomyces│fungicidicus

恶臭假单孢菌模式菌株安全等级1种属Pseudomonas│putida

德式乳杆菌保加利亚亚种模式菌株yes安全等级1种属Lactobacillus│delbrueckii subsp.bulgaricus

马赛博斯氏菌安全等级1提供形式冻干物种属Bosea│massiliensis

兔蛋白激酶A-C酶联免疫试剂盒

英文名称:Rabbit PKA-C ELISA Kit

反应性:Rabbit

样品类型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

检测范围:250-16000 pg/ml

灵敏度:10 pg/ml

检测目标:PKA-C

应用:Sandwich ELISA
发酵冬虫夏草菌粉英文名称:Fermented Cordyceps powder保存:20℃,避光规格:0.5g端粒酶抑制因子PinX1一抗

大皂角英文名称:Gleditsia保存:20℃,避光规格:1g泌乳素受体一抗

土牛膝英文名称:Achyranthes aspera保存:20℃,避光规格:5g丝/苏蛋白酶4C一抗

葫芦巴英文名称:Fenugreek保存:20℃,避光规格:1g酯酶Cβ2一抗

浮萍英文名称:Duckweed保存:20℃,避光规格:1g胞质分裂调控蛋白1一抗

海金沙英文名称:The Sea Sands保存:20℃,避光规格:1g猪圆环Ⅱ型衣壳蛋白

急性子英文名称:The acute保存:20℃,避光规格:4g氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯基抗氧化蛋白一抗

乌灵菌粉英文名称:Wuling mycelia powder保存:20℃,避光规格:2g相互作用结构域蛋白1一抗

麻(中麻)英文名称:Ephedra (Ephedra intermedia)保存:20℃,避光规格:1g化脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)一抗

西河柳英文名称:Chinese tamarisk保存:20℃,避光规格:2g化蛋白酶2A(PP2Aα)一抗

去二异香英文名称:Go to the hydrogen two isoeugel保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)一抗

L脯英文名称:The L Pro保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支脂酶2结构域3一抗

L羟脯英文名称:L hydroxyproline保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支石骨症相关蛋白PLEKHM1一抗

二姜黄素英文名称:Two hydrogen curcumin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支血小板白细胞C激酶底物同源结构域M2一抗

姜黄素英文名称:Curcumin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支Ⅱ型胶原α1 N端前体肽一抗

去氧姜黄素英文名称:Demethoxycurcumin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白香叶基转移酶1α一抗

双去氧姜黄素英文名称:Bisdemethoxycurcumin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支蛋白香叶基转移酶1β(FTβ)一抗
长柄链格孢(斜面)保存卷曲螺旋结构域蛋白56抗体Albatrelin C中文名:别名:分子式:C22H30O2

卷曲螺旋结构域蛋白116抗体Pyrolin中文名:鹿蹄草素别名:2-Methylhydroquine; 2-Methyl-1,4-benzenediol分子式:C7H8O2

卷曲螺旋结构域蛋白117抗体Anemarrhena B中文名:别名:分子式:C32H34O6

卷曲螺旋结构域蛋白127抗体Androsin中文名:草夹竹桃苷别名:分子式:C15H20O8

卷曲螺旋结构域蛋白138抗体Albatrelin G中文名:别名:分子式:C22H32O3

 

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