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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体 | Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) | BJ-K6876 |
单抗的制备过程:
1.动物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞:与培养好的骨髓瘤细胞混合,人工诱导细胞融合。
3.细胞融合:淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选:HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。(含次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一种培养基,其中三种成分与细胞DNA合成有关,骨髓瘤细胞遗传缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培养杂交瘤细胞:体外培养杂交瘤细胞,从培养液中分离提取单克隆抗体。或者,将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内,从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)产品仅用于科研可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
单克隆抗体:
1.概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用:
(1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
(2)药物导向治疗:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成
(3)分离和纯化抗原分子。
AE3/FITC 荧光素标记阴离子交换蛋白3IgG锚蛋白重复结构域蛋白403,5-双(三氟甲基)甲Mouse RK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) 检测试剂盒
AEV/FITC 荧光素标记禽脑脊髓炎病IgG凋亡抑制因子5[双(三氟乙酰氧基)]Mouse RK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) 检测试剂盒
AEBP1/FITC 荧光素标记脂肪细胞增强结合蛋白1Ig通道蛋白-3[双(三氟乙酰氧基)]Mouse -4 (Neurotrophin 4) 检测试剂盒
AF6/Afadin/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝状肌动蛋白结合蛋白IgG载脂蛋白D3,5-二甲基苄基溴Mouse NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) 检测试剂盒
phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白IgG丁酰基辅酶A合成酶33,5-二甲基苄基溴Mouse NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2) 检测试剂盒
AGER/RAGE /FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物特异性受体IgG脂肪细胞源性亮氨酸氨基肽酶(血管内皮细胞生长因子诱导蛋白)2,5-二氟酚Mouse NGAL (Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) 检测试剂盒
AGEs/FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物IgG线粒体凋亡诱导因子22,5-二氟酚Mouse (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) 检测试剂盒
AGER/RAGE/Cy3 荧光素Cy3标记晚期糖基化终末产物特异性受体IgGABL2蛋白3,4-二氟酚Mouse NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) 检测试剂盒
SLAMF6/LY108/FITC 荧光素标记SLAMF6IgG癌膜相关蛋白101二硫代磷酸二乙酯Mouse IRF5 (Ierferon Regulatory Factor 5)
CD86/B7-2 /FITC 荧光素标记CD86IgG立即早期癌基因BRLF1(鼻咽癌基因)二硫代磷酸二乙酯Mouse IL-12 p35 (Ierleukin 12 p35) 检测试剂盒
CD90/Thy-1/FITC 荧光素标记CD90IgG脑源神经营养因子甘氨酰肌氨酸Mouse IL-12/p40 (Ierleukin 12 p40) 检测试剂盒
ICAM-2/CD102 /FITC 荧光素标记细胞间粘附分子-2IgGβ淀粉样前体蛋白裂解酶21,2-环氧辛烷Mouse FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) 检测试剂盒
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor/FITC 荧光素标记CD105/转化生长因子β受体IgG螺旋一环一螺旋蛋白51,2-环氧辛烷Mouse IL-6R (Ierleukin 6 Receptor) 检测试剂盒
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor /RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记CD105/转化生长因子β受体IgG二磷酸3核苷酸酶1,2-环氧辛烷Mouse IL-19 (Ierleukin 19) 检测试剂盒
CD107a/LAMP-1/FITC 荧光素标记溶酶体相关膜蛋白1IgG脑蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶29卡马西平Mouse IL-20 (Ierleukin 20) 检测试剂盒
CD107a/LAMP-1/PE 荧光素PE标记溶酶体相关膜蛋白1IgG智力发育调节相关蛋白BRWD3卡马西平Mouse ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) 检测试剂盒
磷酸化乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体Rhizobium│sp.分离基物: 根瘤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no固氮培养基: 63生长条件: 28-30定期移植法
嗜渗正青霉种属: Eupenicillium│osmophilum分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: yes培养基: CM0072生长条件: 25℃真空冷冻干燥法
Bacillus│subtilis subsp. subtilis提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no培养基: 0002生长条件: 30℃液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Lactobacillus│fermeum分离基物: 健康孕妇分泌物提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no培养基: CM0006生长条件: 37℃-80℃冰箱冻结法
Eimeria│perforans分离基物: 兔粪便提供形式: 其他安全等级: 1模式株: no用于科研培养基: 0生长条件: 37其他;
Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 0012生长条件: 28℃液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法
Amanita│solitania提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 14生长条件: 25-28℃-80℃冰箱冻结法;矿物油法;定期移植法
Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuze分离基物: 红锥提供形式: 斜面培养物模式株: no培养基: 14生长条件: 25定期移植法
O1群霍乱弧种属: Vibrio│cholerae O1提供形式: 冻干物安全等级: 3模式株: /classical 稻叶(Inaba)培养基: CM0116生长条件: 37℃真空冷冻干燥法
多克隆抗体定制:
当机体受到抗原刺激后, 产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物,称为多克隆抗体。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,产品仅用于科研被广泛应用于免疫学诊断领域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 还能激活补体,结合并增强巨噬细胞的吞噬功能(调理作用和 ADCC 效应),穿过胎盘,保护胎儿及新生婴儿免受感染。
(2)IgA :分单体和双体两种。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,体内受感染后早产生的抗体,具有很强的激活补体和调理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于诊断早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 细胞表面,是 B 细胞识别抗原的受体。
(5)IgE :血清中含量少的抗体,某些过敏性体质的人血清中可检测到,参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。
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