当前位置:上海邦景实业有限公司>>PCR检测试剂盒>>荧光核酸试剂>> 5 mg/50 mg罗丹明123
产品名称:罗丹明123
规格:5 mg/50 mg
货号:BJP1201
分类:荧光核酸试剂
产品仅用于科研储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
染料法
探针法
可进行相对,定量表达分析,定性分析,SNP检测等
实验报告
·电泳图 ·标准曲线
·溶解曲线 ·扩增曲线
·完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
探针法:
aqMan 探针是一种寡核苷酸探针,它的荧光与目的序列的扩增相关。它与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。荧光基团连接在探针的5’ 末端,而淬灭剂则在3’ 末端。当完整的探针与目标序列配对时,荧光基团发射的荧光因与3’ 端的淬灭剂接近而被淬灭。但在进行延伸反应时,聚合酶的5’ 外切酶活性将探针进行酶切,使得荧光基团与淬灭剂分离。随着扩增循环数的增加,释放出来的荧光基团不断积累。因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。相对于染料法,Taqman探针法具有更高的特异性和准确性。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
操作程序:
由您提供该实验中目的基因的相关资料(如:基因名称、序列等信息),我们共同探讨服务的可能性和技术路线;
商定服务收费、付款方式、服务期限等,并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本(100mg组织或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样本
PCR所需引物/探针(如果用探针法),可以由您自己提供,也可以委托本公司设计合成(费用另计)。如果由您自己提供,必须是PAGE纯化的高质量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。
产品仅用于科研提供实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
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罗丹明123Coronavirus│Infectious bronchitis virus分离基物: 病死鸡肾脏冻干物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 研究培养基: 0生长条件: 37存储条件: 真空冷冻干燥法;
Coronavirus│Infectious bronchitis virus分离基物: 鸡胚冻结物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 用于免疫原性研究,生产培养基: 0生长条件: 37
Brevundimonas│vesicularis分离基物: 矿土冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 820生长条件: 29℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Alcaligenes│aquamarinus分离基物: 牛粪冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 用于麻发酵。培养基: CM0315生长条件: 30℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Sphingomonas│sp.冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0002生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Xanthomonas│campestris分离基物: 土壤冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 农抗检定菌培养基: 271生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
紫黑杜擀氏菌种属: Duganella│violaceinigra分离基物: 森林土壤冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 904生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
大肠埃希氏菌种属: Escherichia│coli冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 33生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Trichoderma│pseudokoningii分离基物: 土壤冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0014生长条件: 25-28℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
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