过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体 返回列表页

免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其*覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
详细介绍：

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抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。产品仅用于科研保存前需经除菌并添加防腐剂。
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抗体的生活习性：
(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。
(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)产品仅用于科研具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
LB琼脂人肺间充质干细胞肾动脉内皮细胞ABCA1(ATP binding cassette transporter A1)  腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗原

玉米粉琼脂培养基人脊柱间充质干细胞肾动脉平滑肌细胞TFPI/LACI  组织因子途径抑制剂

高氏一号合成培养基人微血管内皮细胞肾小管上皮细胞GLUT12  葡萄糖转运蛋白12

L型细菌高渗糖增菌培养基人上皮细胞肾小球内皮细胞EGFRvIII  表皮生长因子受体III型突变体抗原

L型细菌高渗盐增菌培养基人成纤维细胞子宫内膜上皮细胞CD26  CD26抗原

叠氮钠葡萄糖肉汤人脐静脉内皮细胞卵巢颗粒细胞ABCG1 peptide  三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗原

乙基紫叠氮钠肉汤人脐动脉内皮细胞淋巴管内皮细胞Cardiac Troponin T  心肌特异性肌钙蛋白T

孟加拉红（虎红）培养基人脐静脉平滑肌细胞淋巴成纤维细胞BACE( ASP2 )   β分泌酶（抗原）

Fibulin 1/FITC  荧光素标记抗“衰老关键蛋白”IgG卷曲螺旋结构域蛋白1522-溴-4-(三氟甲基)苯甲酸Rat MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ(Major  Histocompatibility ComplexⅡ) 检测试剂盒

Phospho-FHIT (Tyr114) /FITC  荧光素标记抗磷酸化脆性组氨酸三联体IgG甘油二酯胆碱磷酸转移酶2,5-双(三氟甲基)苯胺Rat MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ(Major  Histocompatibility ComplexⅢ) 检测试剂盒

Fibulin-5/FITC  荧光素标记抗“衰老关键蛋白”IgG嗜铬粒素B2,5-双(三氟甲基)苯胺Rat RETN (Resistin) 检测试剂盒

FLG/FITC  荧光素标记丝聚蛋白/中间丝蛋白IgG血管加压素激活钙启动受体蛋白12,5-双(三氟甲基)苯胺Rat CA15-3 (Carbohydrate Antigen 15-3) 检测试剂盒

FLIP S/L /FITC  荧光素标记凋亡调节基因之一IgG细胞色素P450Ⅱj3谷氨酸利塞膦酸盐半五水合物Rat MAT (Matrilysin) 检测试剂盒

FLIPS/FITC  荧光素标记凋亡调节基因之一（短型）IgG钙激活氯离子通道4三羟甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) 检测试剂盒

FN /FITC  荧光素标记纤维连结蛋白IgG周期素依赖性激酶6三羟甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) 检测试剂盒

FN/RBITC  红色荧光素标记纤维连接蛋白IgG周期素依赖性激酶73，4，5-TrimethoxybenzhydrazideRat MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) 检测试剂盒
过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体柑橘藻斑病*Mouse FLT1/VEGFR1 (Vascular Endothial Growth Factor Receptor 1)  Kit 小鼠肾癌细胞

纺锤形赖氨酸芽孢杆Mouse VEGFR-2/KDR (Vascuoar Endothial Growth Factor Receptor 2)  Kit 人类冠状动脉内皮细胞

空泡极单胞Mouse HO-1 (Heme Oxygenase 1)  Kit人正常结肠上皮细胞

地衣芽孢杆Mouse HO-2 (Heme Oxygenase 2, Decycling)  Kit  小鼠视网膜神经节细胞株

食蔗糖葡糖酸醋杆Mouse RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B)  Kit人正常胰腺导管上皮细胞

酿酒酵母Mouse HJV (Hemojuvin)  Kit  人微血管内皮细胞

炭疽沉淀素血清Mouse HPA (Heparanase)  Kit 人多形性恶性胶质瘤细

胶胞（可订购）Mouse ALB (Albumin)  Kit肝枯否细胞