磷酸化周期素D3抗体 返回列表页

免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其*覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
详细介绍：

​
抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。产品仅用于科研保存前需经除菌并添加防腐剂。
​
抗体的生活习性：
(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。
(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)产品仅用于科研具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
USP11 aibody110 kDa P51784Human

USP11 aibody110 kDa P51784Human

USP12 aibody43 kDa O75317Human, Mouse, Rat

USP13 aibody97 kDa Q92995Human, Mouse, Rat

USP13 aibody97 kDa Q92995Human

USP14 aibody52 kDa, Observed 52 kDa, 60 kDa P54578Human, Mouse, Rat

USP15 aibody112 kDa Q9Y4E8Human, Mouse, Rat

膀胱癌突变蛋白1抗体别 名 MBC1; Mutated in bladder cancer protein 1; coiled coil domain coaining 112; coiled-coil domain coaining 112; MBC1; CC112_HUMAN.

膜相关环指蛋白4抗体别 名 E3 ubiquitin protein ligase MARCH4; RNF174; KIAA1399; MARCH 4; MARCH IV; Membrane associated RING CH protein IV; Membrane associated ring finger (C3HC4) 4; Membrane associated RING finger protein 4; mKIAA1399; RING finger protein 174; MARH4_HUMAN.

有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体别 名 Homolog of REV7 S cerevisiae; HREV7; MAD2 homolog; MAD2 like 2; MAD2 mitotic arrest deficie like 2; MAD2B; Mitotic Arrest Deficie 2 L2; Mitotic arrest deficie homolog like 2; Mitotic arrest deficie like 2 (yeast); Mitotic arrest deficie yeast homolog; Mitotic spindle assembly checkpoi protein MAD2B; REV 7; REV7; Weakly similar to Mitotic MAD2 protein (S cerevisiae).
磷酸化周期素D3抗体Cryphonectria│parasitica (Murrill) M. E. Barr分离基物: 枝干病斑提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 14生长条件: 27定期移植法

Rhodotorula│sp.分离基物: 植物提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: yes培养基: 0013生长条件: 17℃液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

Bacillus│sp.分离基物: 污水提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no培养基: 0002生长条件: 30℃液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no淀粉发酵制酒精。培养基: CM0077生长条件: 28-30℃真空冷冻干燥法

Mycobacterium│tuberculosis提供形式: 冻干物安全等级: 3模式株: no研究生长条件: 37℃真空冷冻干燥法

Flammulina│velutipes提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no固体栽培培养基: 0014生长条件: 25℃

Exiguobacterium│sp.分离基物: 市售水产体表提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no在无机盐培养基中以5mg/l的孔雀石绿为碳源，与1/6LB共代谢培养，2天内孔雀石绿降解率大于70%培养基: 0033生长条件: 30℃-80℃冰箱冻结法；定期移植法

Escherichia│coli分离基物: 奶牛提供形式: 冻干物安全等级: 2模式株: no科研及血清定型培养基: 335生长条件: 37真空冷冻干燥法;

Brucella│abortus BiovarⅣ分离基物: 病牛提供形式: 冻干物安全等级: 3模式株: no作为生物学分型鉴定参考株。培养基: 401生长条件: 37真空冷冻干燥法;