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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
6号染色体开放阅读框62抗体 | C6orf62 | BJ-K7914 |
单抗的制备过程:
1.动物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分离脾淋巴细胞:与培养好的骨髓瘤细胞混合,人工诱导细胞融合。
3.细胞融合:淋巴细胞杂交瘤的制备
4.杂交瘤细胞的筛选:HAT选择培养基筛选出杂交瘤细胞。(含次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一种培养基,其中三种成分与细胞DNA合成有关,骨髓瘤细胞遗传缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培养杂交瘤细胞:体外培养杂交瘤细胞,从培养液中分离提取单克隆抗体。或者,将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内,从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。
6.单克隆抗体的制备和冻存、纯化
实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)产品仅用于科研可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
单克隆抗体:
1.概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。
2.特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高。
3.单克隆抗体的应用:
(1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。
(2)药物导向治疗:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成
(3)分离和纯化抗原分子。
改良罗氏培养基基础人真皮成纤维母细胞-胎儿原代肾实质细胞培养特制添加剂GRP( Gastrin Releasing Peptide ) 促胃泌素释放肽(抗原)
酸性L-J培养基基础人真皮成纤维母细胞-新生原代骨细胞培养特制添加剂BSA(标准) 牛血清白蛋白(标准)
碱性L-J培养基基础人真皮成纤维母细胞-成人原代滑膜皮细胞培养特制添加剂MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘碱性蛋白(多肽)大鼠
乳糖蛋白胨培养液人毛细胞原代骨骼肌细胞培养特制添加剂MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG) 髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白(活性多肽)
乳糖蛋白胨培养液人生发基质细胞原代神经元细胞培养特制添加剂IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰岛素样生长因子-I(抗原)
马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA)人外根鞘细胞原代神经胶质细胞培养特制添加剂VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性肠肽
马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(不含氯霉素)人内根鞘细胞原代单核细胞培养特制添加剂IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰岛素样生长因子-II(抗原)
Cary-Blair氏运送培养基人角质细胞原代软骨细胞培养特制添加剂TP-5(Thymopentin) 胸腺五肽
E.coli O157/HRP 辣根过氧化物酶标记抗大肠埃希氏菌O157IgG染色质修饰蛋白2B2,5-呋喃二羧酸Rat HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) 检测试剂盒
EPEC/E.coli /HRP 辣根过氧化物酶标记抗肠致病性大肠杆菌IgG细胞骨架相关蛋白1/微管蛋白折叠辅助因子B2,5-呋喃二羧酸Rat HDGF (Hepatoma Derived Growth Factor) 检测试剂盒
EPEC/E.coli/HRP 辣根过氧化物酶标记抗普通大肠埃希菌菌体蛋白IgG神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN52,5-呋喃二羧酸Rat Hepc (Hepcidin) 检测试剂盒
E.coli/EPEC/FITC 荧光素标记抗普通大肠埃希菌菌体蛋白IgG神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN81-甲基-3-吲哚酸Rat HNRPA1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A1) 检测试剂盒
E.coli O6 (Escherichia coli O6)/FITC 荧光素标记大肠埃希杆菌O6IgGcereblon蛋白1-甲基-3-吲哚酸Rat HK1 (Hexokinase 1) 检测试剂盒
E.coli O139/FITC 荧光素标记抗志贺毒素大肠杆菌O139IgG补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白5苯二乙酯Rat HK (Hexokinase) 检测试剂盒
E.coli O157/FITC 荧光素标记抗大肠埃希氏菌O157IgG胞苷尿苷鸟苷结合蛋白1苯二乙酯Rat HDL (High Density Lipoprotein) 检测试剂盒
EPEC/E.coli /FITC 荧光素标记兔抗肠致病性大肠杆菌IgG原肠胚双向形成相关蛋白苯二乙酯Rat HMGB-1 (High Mobility Group Protein B1) 检测试剂盒
6号染色体开放阅读框62抗体沃氏富盐Mouse gGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) Kit 大鼠血管内皮细胞
多主葡萄壳Mouse GJb1 (Gap Junction Protein Beta 1) Kit 小鼠胰岛素瘤胰岛a细胞
变异链霉Mouse GIP (Gastric Inhibitory Polypeptide) Kit 大鼠主动脉平滑肌细胞
明尼苏达被毛孢Mouse GT-34 (Gastrin 34) Kit 鸡巨噬细胞
双孢蘑菇Mouse CA199 (Gastrointestinalcancer Marker-CA199) Kit人结膜上皮细胞
白地霉Mouse GKN2 (Gastrokine 2) Kit 牛主动脉内皮细胞
郝氏链霉Mouse GATA1 (GATA Binding Protein 1) Kit 小鼠血管内皮瘤细胞
嗜肉考克氏Mouse GATA2 (GATA Binding Protein 2) Kit 正常人表皮角质形成细胞
多克隆抗体定制:
当机体受到抗原刺激后, 产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。 抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物,称为多克隆抗体。由于具有可识别多个表位、可引起凝集反应、沉淀反应等优点,产品仅用于科研被广泛应用于免疫学诊断领域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 还能激活补体,结合并增强巨噬细胞的吞噬功能(调理作用和 ADCC 效应),穿过胎盘,保护胎儿及新生婴儿免受感染。
(2)IgA :分单体和双体两种。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,体内受感染后早产生的抗体,具有很强的激活补体和调理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于诊断早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 细胞表面,是 B 细胞识别抗原的受体。
(5)IgE :血清中含量少的抗体,某些过敏性体质的人血清中可检测到,参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。
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