磷酸化EGF应答因子1抗体 返回列表页

免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其*覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
详细介绍：

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抗体的制备过程：
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。产品仅用于科研保存前需经除菌并添加防腐剂。
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抗体的生活习性：
(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。
(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。
(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)产品仅用于科研具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
UBQLNL aibody53 kDa, Observed 70 kDa Q8IYU4Human, Mouse

UBR2 aibody66 kDa Q8IWV8Human, Mouse

UBR7 aibody48 kDa Q8N806Human, Mouse, Rat

UBTD2 aibody50 kDa Q8WUN7Human, Mouse, Rat

UBXD1 aibody50 kDa Q9BZV1Human, Mouse, Rat

UBXD2 aibody60 kDa Q92575Human, Mouse, Rat

UBXN1 aibody35 kDa, Observed 45 kDa Q04323Human, Mouse, Rat

突变的黑色素瘤相关抗原1抗体别 名 EXPAND1; FLJ14868; FLJ22283; HSPC211; Manoma associated aigen (mutated) 1; Manoma ubiquitous mutated protein; MGC131891; MGC163315; MUM 1; MUM-1; MUM1; MUM1_HUMAN; Mutated manoma associated aigen 1; Mutated manoma-associated aigen 1; Protein expandere; PWWP domain coaining protein MUM1; PWWP domain-coaining protein MUM1.

黑色素瘤相关抗原10抗体别 名 Cancer/testis aigen 1.10; CT1.10; MAGE 10 aigen; MAGE10; Manoma aigen family A 10; Manoma associated aigen 10; MAGAA_HUMAN.

肌球蛋白XVIIIb抗体别 名 MYO18B; myosin 18B; Unconveional myosin-XVIIIb;
磷酸化EGF应答因子1抗体Cordyceps│militaris (L.) Link提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 14生长条件: 25定期移植法

Bacillus│thuringiensis分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no生物杀虫剂培养基: 2生长条件: 30℃液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

Bacillus│thuringiensis分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物；冻干物安全等级: 1模式株: no生物杀虫剂培养基: 2生长条件: 37℃液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

Burkholderia│gladioli提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no培养基: 0002生长条件: 30℃液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

芽孢杆种属: Bacillus atrophaeus提供形式: 冻干管，斜面培养物安全等级: 1模式株: no灭指示。培养基: 蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。传代方法: ①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无水或培养基充分溶解，平板涂布，活化培养。

②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。生长条件: 30℃，好氧2-8℃冷藏，冻干管10年以上，斜面1-3个月。

Streptomyces│griseoplanus Backus et al.分离基物: 植物根际提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 12生长条件: 28-30定期移植法

Cytospora│salicis (Corda) Rabenh.分离基物: 枝杆提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式株: no培养基: 14生长条件: 26定期移植法

伤寒沙门氏种属: Salmonella│typhi提供形式: 冻干物安全等级: 2模式株: no噬体分型用 Vi 46　　　9,12,Vi　d　-培养基: CM0051生长条件: 37℃真空冷冻干燥法

酿酒酵母种属: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 冻干物安全等级: 1模式株: no培养基: 0013生长条件: 25-28℃液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法