着丝粒蛋白抗体ZW10的生物素化标记实验要点

着丝粒蛋白抗体ZW10的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体
膜粘连蛋白2受体抗体
血管紧张素1转换酶抑制剂抗体
拮抗凋亡转录因子抗体
α-1抗胰糜蛋白酶抗体
α-1抗胰蛋白酶抗体
ATP结合蛋白家族6抗体
三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体
脂联素受体2抗体
ANGEL1蛋白抗体
ANGEL2蛋白抗体
ANKLE2蛋白抗体
特异性锚样蛋白1抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体
锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体
锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体
锚蛋白重复结构域蛋白22抗体
锚蛋白重复结构域蛋白50抗体
氢离子转运ATP合成酶6G抗体
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体
芳香基硫酸酯酶K抗体
神经元突触前膜蛋白抗体
锚定蛋白G抗体
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体