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食管癌细胞:TE-1

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所  在  地上海市

更新时间:2022-05-06 15:50:10浏览次数:151次

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原代细胞
货号 GOY-01X0230
食管癌细胞:TE-1 公司正在出售的产品:50次 柱式植物RNAout Column Plant RNAOUT 4℃保存2 ug pCEP4-CAT pCEP4-CAT 低温运输,-20℃保存酪蛋白葡萄糖琼脂 Sabouraud Dextrose Agar 250g1g 对苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 p-Nitrophenyl-β-D-Galacto-Pyranoside(PNPG) -20℃保

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

食管癌细胞:TE-1 

规格

1×10⁶cells/T25培养瓶

分类

细胞系

货号

GOY-01X0230

商品介绍:

名称 食管癌细胞:TE-1 

别称TE1

种属人类

年龄(性别)不详

组织来源食管癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

生长培养基RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例1:2-1:4

推荐换液频率2~3/

倍增时间~60小时

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

USP33 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

WWP2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

FOXM1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

CAPN1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

OS9 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

DIDO1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

CTNNA1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

ALPP 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

IFIT5 基因全长ORF克隆 

食管癌细胞:TE-1 Rabbit anti-mouse Kappa light chain/FITC  FITC标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1ml

GGT6  γ-谷氨酰转肽6抗体 规格: 0.2ml

FAM150A  FAM150A蛋白抗体 规格: 0.2ml

HSP90 alpha  热休克蛋白90α/HSP90 α抗体 规格: 0.2mlE.coli/EPEC  大肠埃希菌菌体蛋白抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗猴IgG 规格: 0.3ml

TPA/PLAT  组织型纤溶原激活剂抗体 规格: 0.1ml

2 ug pFastbac His HT A pFastbac His HT A 低温运输,-20℃保存

发酵培养基 Mannitol Medium 250g

200 mL 人内皮细胞分离液1.060 Cell Separation Solution -20℃保存

200mL 乙烯乙二醇 Ethylene Glycol -20℃保存

制备培养基 Penicillinase Preparation Medium 250g

1瓶 HEK293细胞株 HEK293 低温运输和保存

 


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