人膀胱癌细胞：5637 返回列表页

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商品介绍：

使用方法：
收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

AR42J (大鼠胰腺外分泌细胞)    大鼠胰腺外分泌细胞：AR42J     1×10⁶cells/T25培养瓶    

ARPE-19 (人视网膜上皮细胞)     人视网膜上皮细胞：ARPE-19     1×10⁶cells/T25培养瓶    

AsPC-1 (人转移胰腺腺癌细胞)     人转移胰腺腺癌细胞：AsPC-1     1×10⁶cells/T25培养瓶    

AtT-20 (小鼠垂体瘤细胞)    小鼠垂体瘤细胞：AtT-20     1×10⁶cells/T25培养瓶    

B16 (小鼠黑色素瘤细胞)    小鼠黑色素瘤细胞：B16     1×10⁶cells/T25培养瓶    

Bcap-37 (人乳腺癌细胞)    人乳腺癌细胞：Bcap-37     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BEL-7402 (人肝癌细胞)    人肝癌细胞：BEL-7402     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BEL-7404 (人肝癌细胞)    人肝癌细胞：BEL-7404     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BGC-823 (人胃腺癌细胞(低分化))    低分化：BGC-823     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BHK-21 [C-13] (仓鼠肾成纤维细胞)    仓鼠肾成纤维细胞：BHK-21 [C-13]     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BIU-87 (人膀胱癌细胞)     人膀胱癌细胞：BIU-87     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BRL 3A (大鼠肝细胞)    大鼠肝细胞：BRL 3A     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BNL CL.2 (小鼠胚胎肝细胞)    小鼠胚胎肝细胞：BNL CL.2     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BRL (大鼠肝细胞)    大鼠肝细胞：BRL     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BS-C-1 (非洲绿猴肾细胞)    非洲绿猴肾细胞：BS-C-1     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BT-474 [BT474] (人乳腺导管癌细胞)     人乳腺导管癌细胞：BT-474 [BT474]     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BT-549 (人乳腺管癌细胞)     人乳腺管癌细胞：BT-549     1×10⁶cells/T25培养瓶    

BxPC-3 (人原位胰腺腺癌细胞)     人原位胰腺腺癌细胞：BxPC-3     1×10⁶cells/T25培养瓶    

C127 [C-127] (小鼠乳腺肿瘤细胞)    小鼠乳腺肿瘤细胞：C127 [C-127]     1×10⁶cells/T25培养瓶    

C2C12 (小鼠成肌细胞)    小鼠成肌细胞：C2C12     1×10⁶cells/T25培养瓶    

血管紧张素1转换酶抑制剂抗体    

拮抗凋亡转录因子抗体    

α-1抗胰抗体    

α-1抗体    

ATP结合蛋白家族6抗体    

三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体    

脂联素受体2抗体    

ANGEL1蛋白抗体    

ANGEL2蛋白抗体    

ANKLE2蛋白抗体    

睾丸特异性锚样蛋白1抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白22抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白50抗体    

氢离子转运ATP合成酶6G抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白26抗体    

锚蛋白重复结构域蛋白26抗体    

丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体    

人膀胱癌细胞：5637芳香基硫酸酯酶K抗体    

神经元突触前膜蛋白抗体    

锚定蛋白G抗体    

肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体    

整合素样金属蛋白酶与型抗体