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货号 | GOY-01X0288 |
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使用方法:
收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称 | 乳腺癌细胞:MDA-MB-468 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
分类 | 细胞系 |
货号 | GOY-01X0288 |
商品介绍:
名称 乳腺癌细胞:MDA-MB-468 别称MDA-MB 468; MDA-MB468; MDAMB468; MDA-468; MDA468; MB468; MD Anderson-Metastatic Breast-468 种属人类 年龄(性别)女性,51岁 组织来源乳腺;乳房;腺癌 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述MDA-MB-468细胞是由Cailleau·R等人于1977年从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供体组织的G6PD等位基因杂合,但MDA-MB-468细胞始终表现为G6PD A表型。p53MDA-MB-468细胞是由Cailleau·R等人于1977年从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供体组织的G6PD等位基因杂合,但MDA-MB-468细胞始终表现为G6PD A表型。p53基因273位密码子存在G→A突变,从而导致Arg→His替代。每个MDA-MB-468细胞上存在1×10^6个EGF受体。 生物安全等级1 生长培养基Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:2-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~36-62小时 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,100% 温度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5).) 受体表达情况epidermal growth factor (EGF); transforming growth factor alpha (TGF alpha) 抗原表达情况Blood Type AB; HLA Aw23, Aw30, B27, Bw35, Cw2, Cw4 (patient) 注意事项1、该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基进行培养,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,会产生细胞毒性; 2、如您没有无二氧化碳的培养箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培养基时即可正常通入5%二氧化碳; 2、配套专用培养基默认Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,请联系销售下单备注更改。 |
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人 CA XII 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 CA II 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
人 CA II 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 TRAILR1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 PTP1B / PTPN1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 CA IX 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
人 CA IX 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
小鼠 IL10 基因全长
乳腺癌细胞:MDA-MB-468 phospho-IRS1(Ser302) 磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1ml
CDKN2B/p15 INK4b 细胞周期蛋白依赖性激抑制剂2B抗体 规格: 0.2ml
Exportin 5 核输出蛋白5抗体 规格: 0.2ml
APOE/Apo E2 载脂蛋白E抗体 规格: 0.1mlFOXN1 叉蛋白N1抗体 规格: 0.2ml
GNRPX/PLEKHJ1 核苷酸结合蛋白X抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Bio 标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.3ml
Secretin receptor 分泌素受体抗体 规格: 0.2ml
25次 一站式全血mRNAout One-Stop Blood mRNA Isolation Kit 4℃保存
1瓶 ES-2细胞株 ES-2 低温运输和保存
阪崎肠杆菌检验培养基
30次 环状DNA全基因组扩增试剂盒 Circular DNA WGA Kit -20℃保存
2 ug pCo Hygro pCo Hygro 低温运输,-20℃保存
乳糖蛋白胨培养液(含小倒管) Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包
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