乳腺癌高转移细胞：MDA-MB-435 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    乳腺癌高转移细胞：MDA-MB-435 

别称MDA-MB435; MDAMB435; MDA.MB.435; MDA-435; MDA 435; MDA435; MD Anderson-Metastatic Breast-435

年龄（性别）女；48岁

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述MDA-MB-435细胞是于1976年建系，源自一位48岁患有乳腺癌女性的胸腔积液。但近来证明MDA-MB-435细胞被M14黑色素瘤细胞污染。

生长培养基Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例1:3-1:4

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间~26-38 hours

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，100%

温度：37℃

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

人 CA XII 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签

人 ALK-3 / BMPRIA 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

人 MDK / NEGF2 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

人 MTOR 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

小鼠 DLL1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

人 ETS1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

人 ST6GAL1 转录变体2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带HA标签

人 PKM

乳腺癌高转移细胞：MDA-MB-435 含糖牛肉汤培养基 Beef Broth Medium(with Sugar) 250g

2 ug pcDNA3.1/V5-His B pcDNA3.1/V5-His B 低温运输，-20℃保存

BETA-SSA琼脂 BETA-SSA Agar 250g

CDK10  周期素依赖性激10 规格: 0.2mlRabbit Anti-pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1ml

500g 酵母浸膏 Yeast Extract   室温避光干燥保存

100mL TES Buffer,0.2M,pH7.0  TES Buffer,0.2M,pH7.0  常温保存

100mL Denhardt溶液，50×（非同位素用） Denhardt Solution, 50× -20℃保存

PBEF (CT)  内脂素/前B细胞克隆增强因子-2（C端抗体） 规格: 0.1ml

Rabbit anti-MG IgG/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1ml

ADAMTSL1  整合素样金属蛋白与凝样1蛋白抗体 规格: 0.2mlSOX4  核转录因子SOX4抗体 规格: 0.2ml

Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1ml

HHV8/ORF50  人类疱疹毒8抗体 规格: 0.2ml