脑髓母细胞瘤细胞：D283 Med 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    脑髓母细胞瘤细胞：D283 Med 

别称D283 MED; D283-MED; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D283; Med 283; H283

种属人类

年龄（性别）男性，6岁

组织来源小脑

生长特性半贴壁半悬浮

细胞形态上皮细胞样

背景描述D283 Med细胞是由Friedman等人于1985年建系，源自一名6岁患有神经管细胞瘤有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。

生物安全等级1

生长培养基MEM＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例1:2-1:4

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间~ 52 小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO?，5%

温度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.) Yes, in soft agar

基因表达情况The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

人 TLR10 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

人 SMURF2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

人 TGF-beta 1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

小鼠 PD1 / PDCD1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

小鼠 CTSB 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签

小鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

人 LRG1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

人

脑髓母细胞瘤细胞：D283 Med 10U 无机焦（酵母） Pyrophosphatase, Inorganic(yeast) -20℃保存

2 ug pBD-NF-κB pBD-NF-κB 低温运输，-20℃保存

肉膏酵母葡萄糖琼脂  250g

25mL 聚乙二醇溶液 Poly(Ethylene Glycol Solution) 4℃保存

100mL 甲酰胺 Formamide     4℃保存

phospho-GCN2 (Thr667)  磷酸化蛋白激GCN2蛋白抗体 规格: 0.1ml

Rabbit anti-MG IgG/Gold  胶体金标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.5ml

factor V  凝因子5抗体 规格: 0.1ml

SPARCL1/Ecm2  细胞外基质蛋白2抗体 规格: 0.2ml

HMGCL  三羟基三甲基辅A裂解抗体 规格: 0.2mlIL-9  白介素9抗体 规格: 0.1ml

SART3  T淋巴细胞识别的鳞状细胞SART3抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Smad2(Thr220)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体 规格: 0.1ml