当前位置:上海谷研实业有限公司>>生化检测试剂盒>>脂肪酸代谢系列>> 肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)微量法
货号 | GOY-01S6669 |
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商品介绍
测定意义 肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基将酰基转移至L-肉毒碱的反应,在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。 测定原理: 基于肉碱和脂酰在丙二酰存在与否的条件下,通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用,产生脂酰肉碱,并释放出巯基(COA-SH),与Ellman试剂DN-TB反应后,产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm),来定量分析CPT-1的活性。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6669 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
Bacillus cereus脱氧核糖核酸检测试剂盒
Bacillus cereus透明质酸检测试剂盒
Bacillus cereus固氮检测试剂盒
Bacillus cereus条纹花叶病检测试剂盒
Bacillus cereus线条花叶病检测试剂盒
Bacillus cereus1.6二果糖酸检测试剂盒
Bacillus cereus查尔酮异构检测试剂盒
Bacillus mycoides类黄酮-3',5'-羟化检测试剂盒
肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1)微量法检测试剂盒迷迭香 97%Bassoon(BSN) 猴多效生长因子(PTN)联免疫吸附测定试剂盒
左旋延胡索乙素 分析标准品,≥98%(HPLC)Bax peptide Bax(多肽抗原)猴衰老关键蛋白4(FBLN4)联免疫吸附测定试剂盒
红景天苷 分析标准品,≥97.5%(HPLC)Bcl-2(抗原) Bcl-2(多肽抗原)猴蛋白激活受体2(PAR2)联免疫吸附测定试剂盒
丹酚A 分析标准品,≥98%BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 脑源神经营养因子(脑衍化神经营养因子)(多肽片断抗原)猴成纤维生长因子受体2(FGFR2)联免疫吸附测定试剂盒
丁香 98%ACA11 peptide 拟南芥ACA11蛋白多肽抗原猴胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)联免疫吸附测定试剂盒
D(-)-水杨苷 98%AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥)猴抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)联免疫吸附测定试剂盒
D(-)-水杨苷 分析标准品,≥98%bFGF 碱性成纤维生长因子(多肽抗原)猴轴蛋白抑制蛋白2(AXIN2)联免疫吸附测定试剂盒
青藤碱 97%ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管紧张素转换2抗原猴通用转录因子II F肽1(GTF2F1)联免疫吸附测定试剂盒
丁香 98%BNP 脑钠素(多肽抗原)猴周期素依赖性激2(CDK2)联免疫吸附测定试剂盒
番泻叶苷A 分析标准品,≥96%BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脱氧尿苷猴普列克底物蛋白同源物样结构域家族A成员2(PHLDA2)联免疫吸附测定试剂盒
(-)-鹰爪豆碱 >98.0%(GC)C5 过敏素C5(补体C5)抗原猴泛素分解(DUB)联免疫吸附测定试剂盒
番泻苷B 分析标准品,≥97%(HPLC)CA125 (Ovarian cancer Anti-gen) 卵巢癌抗原(抗原)猴硫乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)联免疫吸附测定试剂盒
辛弗林 98%CK19 角蛋白19抗原猴胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)联免疫吸附测定试剂盒
茄尼 96%CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脱氧核糖核(抗原)猴对氧3(PON3)联免疫吸附测定试剂盒
S-腺苷硫氨对磺盐 80%Calponin 1 钙调节蛋白-1(抗原)猴相关血浆蛋白2(PAPPA2)联免疫吸附测定试剂盒
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