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货号 | GOY-01S6643 |
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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6643 |
商品介绍
测定意义 AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。 测定原理: AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
大鼠Anti-PFKL Antibody人GDP解离抑制因子1(GDI1)elisa定量检测试剂盒
小鼠大内皮素Anti-PFKFB1 Antibody人蛋白受体N(PTPRN)elisa定量检测试剂盒
小鼠Ⅷ相关抗原Anti-PFKP Antibody人防御素β1(DEFB1)elisa定量检测试剂盒
人前心钠肽Anti-PGBD1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)elisa定量检测试剂盒
大鼠组蛋白H2bAnti-PGD Antibody人ras同源物基因家族成员a(RHOA)elisa定量检测试剂盒
小鼠ⅨAnti-PGF Antibody人α羟基丁酸脱氢(αHBDH)elisa定量检测试剂盒
人角蛋白13Anti-PGD Antibody人内酰β(LACTβ)elisa定量检测试剂盒
大鼠N端前脑钠素Anti-PHACTR4 Antibody人REST协阻抑因子3(RCOR3)elisa定量检测试剂盒
酰基转移酶(AAT)微量法检测试剂盒(S)-(+)-2-哌 99%层粘连蛋白β1抗原
(2-) 97%核纤层蛋白A抗原
N-苄甘氨乙酯 97%凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体
吡-N-氧化物 95%人鼻咽癌癌因多肽抗原
盐喹那普利 98%淋巴管内皮透明质受体抗原
(R)-(-)-3- 氨吡咯烷 98%血管紧张素转换(抗原)
氮化钽 5 μm,99.5% metals basis整合素alpha E2抗原
4'-叔丁-4-丁酰 98%巨噬表面分子抗原
化钡,二水 99.99% metals basisv-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌因同源物A抗原
碳钡 99.95% metals basis黑色素瘤相关
氢氧化钡,八水 AR,98%丝裂原活化蛋白激激1抗原
碳锶 99.95% metals basis凋亡信号调节激1/丝裂原活化蛋白激激激5抗原
6-溴-2-四氢萘酮 97%抑癌因抗原
间酚 IND蛋白裂解(一种新的癌因)抗原
化氢-乙溶液 化氢含量: 30-40%人巨病UL49抗原
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
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