当前位置:上海谷研实业有限公司>>生化检测试剂盒>>脂肪酸代谢系列>> 肝脂酶(HL)可见分光光度法检测试剂盒
货号 | GOY-01S6646 |
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选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/24样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6646 |
商品介绍:
测定意义
肝酯酶是脂肪分解酶,在肝实质细胞中合成,存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面,可促进脂蛋白中的向类固醇激素转化,血浆中的HL活性增高时,血浆中小颗粒可导致LDL水平升高,加速动脉粥样硬化的发生。
测定原理
肝酯酶水解α-乙酸萘酯产生α-萘酚,可与固蓝B盐形成紫红色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。
自备实验用品及仪器
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
乙酰肝素蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit2,5-二苯恶唑
肝癌相关抗原hca25aHuman SS18L2 ELISA Kit壬酸
己糖激3抗体Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit镍箔
人乙肝病pre S1/S2蛋白抗体Human SSH3 ELISA Kit木香挥发油
人乙肝病pre S1蛋白抗体Human SRFBP1 ELISA Kit毛两面针素
己糖激1抗体Human SSR4 ELISA Kit松脂醇二葡萄糖苷
己糖激2抗体Human SRGAP2 ELISA Kit5-羟色盐酸盐
热休克蛋白90α抗体Human SRGAP1 ELISA Kit红参
肝脂酶(HL)可见分光光度法检测试剂盒(S)-(+)-1--1,2-乙二 99%核因子/k因结合核因子 p52/p100抗体CARD7/NALP1 凋亡加强结构域蛋白7抗体
(±)苄氧羰-a-膦酰甘氨酯 97%线粒体复合物NDUFS7蛋白抗体CARD6 凋亡加强结构域蛋白6抗体
(R)-(-)-2- 98%尼曼匹克C2前体蛋白抗体CARD4 凋亡加强结构域蛋白4抗体
L-(-)-3- 98%烟酰腺嘌呤二核苷1抗体CARD17/INCA 凋亡加强结构域蛋白17抗体
D-(+)-3- 98%一氧化氮合成-1抗体(神经型)CARD15 凋亡加强结构域蛋白15抗体
(S)-(+)-1--1,2-乙二对磺酯 98%转录因子相关蛋白NKX6.1抗体CARD14 凋亡加强结构域蛋白14抗体
DL(±)-3-氨-3- 98%造血蛋白1抗体CARD12 凋亡加强结构域蛋白12抗体
Z-L-氨 98%骨巢蛋白抗体CARD11 凋亡加强结构域蛋白11抗体
(S)-(-)-1,2,3,4-四氢-3-异喹啉 98%NUP54抗体CARD10 BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体
N-对磺酰甘氨 98%亲核素β1抗体CAPZA2/CapZ alpha 2 F肌动蛋白α2亚抗体
O-(四氢-2-)羟 98%谷氨受体NMDAζ1抗体CAPZA1 F肌动蛋白α1亚抗体
(S)-(-)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧 97%谷氨受体NMDAζ2抗体Capsid protein VP1 大鼠细小病H-1株(H-1)抗体(N端)
N-Cbz-L-高丝氨内酯 98%神经元素2抗体capsid protein 猪圆环病Ⅱ型衣壳蛋白
2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨 98%抑癌因NDRG3抗体CAPG2/NCAPG2 染色体相关蛋白2抗体
Cbz-beta-氨-L-氨 98%有丝分裂氧化1抗体CAPD3/hCAP-D3 浓缩素2复合亚D3抗体
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