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结肠腺癌细胞:LS 174T(LS174T)

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所  在  地上海市

更新时间:2022-05-06 14:06:34浏览次数:159次

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货号 GOY-01X0144
结肠腺癌细胞:LS 174T(LS174T)公司正在出售的产品:250mL 碱性胶电泳液,10× Alkaline Gel Buffer, 10× 常温1瓶 HuH-6细胞株 HuH-6 低温运输和保存Hanks氏病毒保存液(pH7.4-7.6) 3ml*36支/盒10mg 中性蛋白 Neutral Protease 4℃保存250mL Sodium Carbonate Bicarbonate,

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

结肠腺癌细胞:LS 174T(LS174T)

规格

1×10⁶cells/T25培养瓶

分类

细胞系

货号

GOY-01X0144

商品介绍:

名称 结肠腺癌细胞:LS 174T(LS174T)

别称Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174; LS174

种属人类

年龄(性别)女性,58

组织来源直肠;结直肠腺癌

生长特性贴壁细胞

细胞形态上皮细胞样

背景描述LS 174T细胞是LS 180细胞的化变种。LS 174T细胞比亲本更易传代,像LS 180细胞一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。电镜研究表明,LS 174T细胞有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。LS 174T细胞直肠抗原3阳性;p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。LS 174T细胞角蛋白染色阳性;LS 174T细胞癌基因c-mycN-mycH-rasN-rasMybfos的表达呈阳性;癌基因k-rassis的表达未做检测。

生物安全等级1

生长培养基MEMATCC改良)10% FBS1% P/S

推荐传代比例1:2-1:4

推荐换液频率2~3/

倍增时间~30-40小时

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

抗原表达情况serologically defined colon cancer antigen 3; Homo sapiens, expressed HLA A2, B13, B50; Blood Type O

基因表达情况carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucin The production of CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days.

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠 IL17B 基因全长ORF克隆

大鼠 IL11 基因全长ORF克隆

大鼠 RELT 基因全长ORF克隆

大鼠 TNFRSF19 基因全长ORF克隆

大鼠 TNFSF11 基因全长ORF克隆

大鼠 TNFRSF12A 基因全长ORF克隆

大鼠 CX3CL1 基因全长ORF克隆

大鼠 CD70 基因全长ORF克隆

大鼠 TNFRSF11A 基因全长ORF克隆

大鼠 TNFRSF11B 基因全长ORF克隆

结肠腺癌细胞:LS 174T(LS174T)EGF  表皮生因子抗体(大鼠) 规格: 0.1ml

OPN/BSP  骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)人 规格: 0.1ml

IL-3R alpha/CD123  白介素3受体a链抗体 规格: 0.2ml

Sulfatase 2  硫酸酯2蛋白抗体 规格: 0.2ml

CRX1  CRX抗体 规格: 0.1ml

发光菌培养基 photobacterium Medium 250g

100mg 链脲佐菌素 Streptozocin STZ -20℃保存

100mL TE Buffer,50X,pH7.4 TE Buffer,50X,pH7.4 常温保存

THRA1  甲状激素受体α1抗体 规格: 0.2ml

1瓶 SV-HUC-1细胞株 SV-HUC-1 低温运输和保存

50T 猪流行性腹泻病毒定量RT-PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

2 ug pAD-SV40T pAD-SV40T 低温运输,-20℃保存

 


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